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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔睪丸間質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 睪丸 |
英文名稱 | Rabbit Testicular Mesenchymal Cells | 貨號(hào) | YS-01X7879 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞分離自睪丸組織；睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質(zhì)呈嗜酸性，細(xì)胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1-2個(gè)核仁線粒體多，呈管嵴狀，無(wú)分泌顆粒。從青春期開(kāi)始，睪丸間質(zhì)細(xì)胞受垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的間質(zhì)細(xì)胞刺激素（黃體生成素）的作用，能合成分泌雄性激素，可促進(jìn)的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持第二性征和性功能。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
小鼠肉瘤瘤株;S180 | GMP-140 ELISA Kit 大鼠血漿α顆粒膜蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CYP11B2： 醛固酮合成酶CYP11B2抗體 0.2ml | GABRD： G基受體δ/GABAA Rδ抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CDX1 尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格 0.2ml | PI3 Kinase p110 beta： 0脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 0.1ml |
Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser896) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化谷受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽) 0.5mg |
Rabbit Anti-dog IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗狗IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | Mfn1： 線粒體融合蛋白1抗體 0.1ml |
KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572) | 18. 卵巢細(xì)胞系統(tǒng) |
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | NA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1(KAN-1)/2004) 酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | COC1/CDDP細(xì)胞，人卵巢癌耐藥株 大黃魚(yú)腎細(xì)胞,PCK細(xì)胞 臍靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
HET-1A, 人食管上皮細(xì)胞 | 兔睪丸間質(zhì)原代細(xì)胞PI3 Kinase p110 beta： 0脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 0.1ml |
MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 大鼠肝細(xì)胞瘤，H-4-II-E細(xì)胞 RAW 264.7(單核巨噬細(xì)胞白血病) | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205 |
Peng EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞 | IL10RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL10RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Anti-IL-17RB/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-17B受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-SAMDC S-腺苷蛋脫羧酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CM-R043大鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 0酸化蛋白質(zhì)酪激酶JAK-1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KIF2B 有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2B抗體 規(guī)格 0.2ml |
ACTH ELISA Kit 魚(yú)促腎上腺皮質(zhì)激素 96T | KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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