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詳細(xì)介紹
兔骺軟骨原代細(xì)胞
兔骺軟骨細(xì)胞分離自骨骺生長(zhǎng)板；骨骺生長(zhǎng)板位于長(zhǎng)骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織，其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂、成熟、肥大，終被骨組織所替換，對(duì)于長(zhǎng)骨生長(zhǎng)具有重要作用。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形，長(zhǎng)軸與軟骨表面平行，越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見(jiàn)數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些骺軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Rabbit Epiphyseal Chondrocyte Cells | 組織來(lái)源 | 生長(zhǎng)板組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7072 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔骺軟骨細(xì)胞
組織來(lái)源：生長(zhǎng)板組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骺軟骨采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
HFSF細(xì)胞，人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞 啤酒酵母 小鼠髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC | ANKHD1： 艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體 0.2ml |
Anti-Phospho-HSL (Ser552) 0酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh 5-HTR3 5-羥色胺受體3抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-CCL13/MCP-4/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh human Fibrinogen Monoclonal 單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml |
HEV 戊型肝炎病毒(抗原) 0.5mg | HCMV/Cytomegalovirus Glycoprotein B： 人巨細(xì)胞病毒抗體 0.1ml |
IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh Factor VII light chain VII 規(guī)格 0.2ml |
FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | 兔腎細(xì)胞;RK13 |
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1 小鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) Rattus |
CM-H064人腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 Rattus |
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IL6 Protein Rat 重組大鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白 |
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076 小鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 兔骺軟骨原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh human Fibrinogen Monoclonal 單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml |
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3 | PFKFB3 Others Human 人 PFK2 / PFKFB3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞，小鼠原成骨細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,LM-6細(xì)胞 CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
RN-c, 大鼠皮質(zhì)元 | Rhesus antibody Rh IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml |
PY ELISA Kit 大鼠交聯(lián)物 96T | SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse |
AATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | LEP(Human Leptin) ELISA kit 人瘦素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
LMX1A： 同源盒轉(zhuǎn)錄因子LMX1A抗體 0.2ml | FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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