詳細介紹
兔脊髓神經干原代細胞
兔脊髓干細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞系統延伸部分。中樞系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的信息。人和脊椎動物中樞系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的(稱為脊)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊的出入可把脊髓也分為相應的31節,31對脊就是由不同的脊椎發出的。干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產生組織的各類細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有組織中,不同的干細胞類型產生的子代細胞種類不同,分布也不同。干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。干細胞在疾病、損傷狀態下具有增殖、遷移,并向細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為系統損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩定的干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。干細胞在培養3-4d后,可形成球,球在培養基中呈懸浮生長。
英文名稱 | Rabbit Spinal Cord Neural Stem Cells | 組織來源 | 脊髓 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8369 |
細胞形態 | 球形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:兔脊髓神經干細胞
組織來源:脊髓
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
培養基:含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態:球形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%,Accutase
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔脊髓干細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的兔脊髓干采用消化后差速貼壁,結合干細胞專用培養基培養篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔脊髓干經Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
M1細胞,小鼠白血病細胞 脆弱擬桿菌 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF | 酸化肽基脯氨酞順反異構酶Pinl抗體 |
酸化分化相關基因NDRG1抗體 | 轉錄因子LBX1抗體 |
腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體 | 酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 |
軸突蛋白2抗體 | 酸化肽基脯氨酞順反異構酶Pinl抗體 |
酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 | 轉錄因子LBX1抗體 |
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) | T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 |
HCCC-9810細胞,人肝癌亞力山大細胞 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株,7WCY1.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2 | Lec1(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×2 |
C57BL/6小鼠干細胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice | SW-13(人腎上腺皮質癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人結腸平滑肌細胞培養基 100mL | 人氣管平滑肌細胞裂解物HTSMCL |
SW1353細胞,人骨肉瘤細胞 島青霉 人胚胎肺成纖維細胞;WI-38 | 兔脊髓神經干原代細胞酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 |
CL-0237U251(人膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EVI2A Others Human 人 EVI2A 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H109人破骨細胞培養基100mL |
IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標簽) | 酸化原癌基因c-kit抗體 |
軸突蛋白2抗體 | 家貓肺細胞;FCA-L2 |
酸化分化相關基因NDRG1抗體 | 腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體 |
酸化原癌基因c-kit抗體 | CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。