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elisa試劑盒固相免疫測定的原理
閱讀:517 發(fā)布時間:2019-5-10 elisa試劑盒固相免疫測定的原理
基礎:抗原或抗體的固相化幾抗原或抗體的酶標記。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,由此進行定性或定量分析。
雙抗體夾心發(fā)
用特異性抗原進行包被和制備酶結合物。此法中受檢標本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高與間接法。乙肝標志物中抗HBsAg的檢測常采用本法。本法關鍵在于酶標抗原的制備,應根據抗原結構的不同,尋找合適的標記方法。
間接法
間接法的優(yōu)點:只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。
競爭法
小分子抗原或半抗原缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗夾心法進行測定,可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中抗原量含量愈多,結合在固相上酶標抗原愈少,后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等elisa測定多用此法。
俘獲發(fā)
IgM的檢測常用語傳染病的診斷。用人抗IgM抗體包被固相,以捕獲血清標本中的IgM。此法常用于病毒性感染的早期診斷。
生物素-親合素法
固相支持物→ 故相抗原化→特異性IgG(待測物)→生物素化抗小鼠IgG(Biotin)→HRP-酶標鏈親合素(Avidin)→底物及顯色劑→顯色和測定。