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血清不穩定原因及解決辦法參考

閱讀:260          發布時間:2023-3-6

血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離 出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。

血清最大的劣勢就是不穩定,不穩定原因如下:
1、來源不穩定
以胎牛血清為例,懷孕母牛在屠宰前腹部被剖開,取出胎牛,在低溫無菌條件下,刺破胎牛的心臟以獲取血清。就這一條,動物倫理組織就可以把你攔住嘮嘮。另外,牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家,我國在對牛血清的質量《中國生物制品主要原輔料質控標準 2000》中提出比較嚴格的標準要求,包括蛋白質含量,細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素,細胞增殖支持等檢查。

2、組分不穩定
還有最讓人鬧心的,動物血清成分復雜,其組分及含量常和動物性別(公胎牛,母胎牛,如激素)、年齡、生理狀態、營養條件不同而有差異,是不是覺得特像中藥。還有,盡管血清大部分成分是已知的,但仍然存在不清楚的組分,所以導致標準化極其困難。所以,不同的血清差異很大,就是同一的不同批次血清差異也很大。

3、用法不穩定
實驗習慣的不同,都可能導致細胞實驗結果的不穩定,比如,有人四度過夜融化,有人急性子,直接扔進水浴鍋。新手拿到一瓶血清,第一個問題就是問
自己,要不要滅活?血清同時含有內毒素、血色素、補體、抗體等其他有害成分,影響細胞生長甚至導致細胞死亡,對某些實驗來說,極為重要。

如此的不穩定,該怎么在實驗過程中盡可能的解決呢?
1、土豪和有得選擇的實驗室,請選擇無血清培養基。
2、不要頻繁更換血清牌子,不同血清來源,工藝,包裝運輸等都有很大差異,盡量不要更換牌子。
3、選定品牌后,對于經過測試過的好用的血清,同一個批次多囤積一些,計算本次實驗的大概用量,然后在多加20%的儲備,放在-20-80度保存。
4、細胞實驗建議每個人用自己的培養基,PBS,胰酶等試劑以及用具,保持實驗條件一致性,避免交叉污染,別給自己添堵,也別給別人添堵。
5、如果實在要更換血清,先將細胞在新的血清里傳兩到三代,適應新的條件后,細胞狀態穩定,再進行后續的實驗。

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