久久无码人妻一区二区三区午夜_久久久久精品久久久久影院蜜桃_亚洲综合欧美色五月俺也去_交换娇妻呻吟声不停中文字幕

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>技術(shù)文章>傳代培養(yǎng)操作步驟及注意事項(xiàng)

技術(shù)文章

傳代培養(yǎng)操作步驟及注意事項(xiàng)

閱讀:239          發(fā)布時(shí)間:2023-11-13

        原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的最大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞株也是可以購(gòu)買的。

1、操作步驟:

(1)、吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。

(2)、向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜。

(3)、置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化。

(4)、吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化。

(5)、使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞。

(6)、用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

(7)、細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。

2、注意事項(xiàng):

(1)、掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷。

(2)、掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。


收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對(duì)比框

產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話 二維碼 意見(jiàn)反饋 在線交流

掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
021-52961052
在線留言
主站蜘蛛池模板: 蒙山县| 浦北县| 任丘市| 和顺县| 金湖县| 赣州市| 深圳市| 嘉峪关市| 宁城县| 清河县| 宁安市| 余江县| 德安县| 土默特左旗| 乐业县| 商城县| 建平县| 阳江市| 枣强县| 临夏市| 五常市| 昔阳县| 宜章县| 阜新市| 巨鹿县| 常山县| 巨野县| 怀安县| 中山市| 潍坊市| 新巴尔虎右旗| 福贡县| 迭部县| 开化县| 阳泉市| 金平| 台湾省| 古田县| 平乐县| 洞口县| 环江|