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技術(shù)文章

從不同方面比較原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)

閱讀:298          發(fā)布時(shí)間:2024-5-13

    原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,一般認(rèn)為,原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以?xún)?nèi)統(tǒng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)",這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),從而可能無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞系。


一、定義方面:

1、原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的第1次培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。

 

2、傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程。對(duì)單層培養(yǎng)而言,80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段。

 

二、特點(diǎn)方面

1、原代細(xì)胞培養(yǎng)與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段。同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。

 

2、當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞不斷分裂,一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長(zhǎng)速度減慢甚至停止;另一方面也會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長(zhǎng)或發(fā)生中毒。

 

三、生存率方面

1、原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程相對(duì)復(fù)雜,培養(yǎng)條件要求也更高。 

2、傳代細(xì)胞培養(yǎng)一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存,傳代細(xì)胞容易增殖。

 

四、原理方面

原代細(xì)胞培養(yǎng):將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖,這一過(guò)程稱(chēng)原代培養(yǎng)。

 

傳代細(xì)胞培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細(xì)胞才能繼續(xù)生長(zhǎng)。這一過(guò)程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實(shí)驗(yàn)所需。傳代要在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行,每一步都需要認(rèn)真仔細(xì)的無(wú)菌操作。

 


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