化工儀器網
詳細介紹
鴨胚胎成纖維細胞
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 鴨胚胎成纖維細胞 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
商品貨號 | A01X2316 |
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質。
五、大腦皮質放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養液懸浮混勻，鋪于經離心形成連續梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養皿中，置于37℃、5％CO2培養箱內靜置培養24h后更換不含素的混合培養基，隨后隔天換液。
原代細胞分離培養的思路：
取材--分離--培養--鑒定
首先將組織從機體中取出，經胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養基中培養，使細胞繁殖到一定系數后進行細胞鑒定。
公司正在出售的產品：
人支氣管上皮細胞 | KG-1人急性髓性白血病細胞專用培養基 |
卷曲螺旋結構域蛋白28A抗體 | PE-Cy7標記的補體C4 γ 鏈蛋白抗體 |
J82人膀胱移行癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的RNA結合蛋白20抗體 |
JAR人胎盤絨毛癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體 |
JAR人胎盤絨毛癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的白介20受體β鏈抗體 |
JF-305人胰腺癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的熱休克蛋白71抗體 |
JF-305人胰腺癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的鋅指蛋白197抗體 |
JEG-3人絨毛膜癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的白介1β/IL-1β抗體 |
JEG-3人絨毛膜癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的親環蛋白（親環）E抗體 |
Jeko-1人套淋巴瘤細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的互養蛋白3抗體 |
Jeko-1人套淋巴瘤細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的黑色瘤相關抗原C1抗體 |
JIMT-1人乳腺癌細胞專用培養基 | 鴨胚胎成纖維細胞PE-Cy7標記的鈣激活鉀通道蛋白KCNT2抗體 |
JIMT-1人乳腺癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的21號染色體開放閱讀框66抗體 |
Jurkat（clone E6-1）人T淋巴白血病細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的前列環受體抗體 |
KB人口腔表皮癌細胞專用培養基 | PE-Cy7標記的19號染色體開放閱讀框80抗體 |
注意事項：
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網