詳細介紹
中文名稱:Annexin V-APC/PI細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱:
產品規格:50T|100T
發貨周期:1~3天
細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定和一些疾病發生過程等方面起著十分重要的作用。 |
在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。在體內,巨噬細胞可以識別翻轉到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應,而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。
AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的PS 高親和力特異性結合。PS 外翻發生在細胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關蛋白出現之前,這使得Annexin V 與PS的結合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。
檢測原理:
在正常的活細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細胞膜的內側,但在早期凋亡的細胞中,PS 從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中。
Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結合??赏ㄟ^細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。用標記了APC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。細胞壞死的過程中也會發生細胞膜損傷,壞死的細胞會結合Annexin V-APC。
Annexin V-APC 通常與細胞膜非滲透性核酸熒光染料聯合使用以檢測凋亡細胞。常用的染料是PI。正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的,核酸染料PI 不能透過完整的細胞膜,但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,PI 能夠透過細胞膜與細胞核結合呈現紅色。
PI/Annexin V-APC試劑盒將Annexin Ⅴ與PI匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區分開來。壞死細胞可以同時與Annexin V-APC和PI 結合顯色,而PI 則被排除在活細胞(APC陰性)和早期凋亡細胞(APC陽性)之外。
Annexin V-APC 細胞凋亡檢測試劑盒可以方便快捷的檢測凋亡細胞,使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。
儲存條件:染色液2-8℃避光保存;結合液2-8℃保存;
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作規程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
依澤替米貝;依折麥布英文名稱: Meloxicam卷曲螺旋結構域蛋白51抗體包裝5g
右雷佐生;右亞英文名稱: Memantine HCl卷曲螺旋結構域蛋白125抗體包裝1g
右雷佐生鹽鹽;右亞鹽鹽英文名稱: Memantine hydrochloride卷曲螺旋結構域蛋白50抗體包裝5g
左西孟旦英文名稱: Methotrexate卷曲螺旋結構域蛋白90A抗體包裝100mg
左旋地平/磺左旋地平英文名稱: Methotrexate卷曲螺旋結構域蛋白71抗體包裝100mg
Diabetes Research英文名稱: Nimesulide卷曲螺旋結構域蛋白37抗體包裝1g
MSDC-0160英文名稱: Miconazole Nitrate卷曲螺旋結構域蛋白47抗體包裝5g
Phenformin hydrochloride英文名稱: Miconazole Nitrate卷曲螺旋結構域蛋白17抗體包裝1g
Sotagliflozin(LX4211)英文名稱: Micronomicin Sulfate卷曲螺旋結構域蛋白58抗體包裝25g
艾格列凈;依帕列凈;恩格列英文名稱: Micronomicin Sulfate卷曲螺旋結構域蛋白94抗體包裝5g
伏格列波糖英文名稱: 4-MUG卷曲螺旋結構域蛋白82抗體包裝1g
格列本脲英文名稱: MinoxidilCDK5激活結合蛋白2抗體包裝250mg
格列吡英文名稱: MinoxidilCDK2相互作用蛋白抗體包裝5g
格列喹酮英文名稱: Minoxidil Sulfate周期蛋白依賴性激14抗體包裝1g
格列美脲英文名稱: Minoxidil Sulfate癌胚抗原相關粘附分子19抗體包裝5g
: AS4.273資源名稱: 產色鏈霉菌 質量規格:>99.0%血血小板衍生生長因子AB試劑盒銀杏內酯B;Ginkgolide B
成團泛菌Pantoea│agglomerans 質量規格:HPLC>98%,標準品血小板因子3試劑盒異鉤藤堿;Isorhychophylli
: Bt0219資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質量規格:>98.5%,BR血小板衍生生長因子CC試劑盒銀杏內酯A;Ginkgolide A
Annexin V-APC/PI細胞凋亡檢測試劑盒氧化鈰
其他 二氧化鈰;氧化高鈰;玻璃白;鈰土;氧化鈰(IV)
英文名稱: Cerium(IV) oxide
其他英文名稱: Cerium dioxide;Ceria
產品規格: 4N
包裝:100克
產品規格: 3.5N
包裝:250克
CAS號:1306-38-3
CeO2=172.11
級別:4N
含量:≥99.99%
其他稀土族:≤0.05%
級別:3.5N
含量:≥99.95%
性狀:純品為重質粉末或立方體結晶,不純品為淺黃色甚至粉紅色至紅棕色(因含有微量鑭、鐠等)。幾乎不溶于水和。相對密度7.3。熔點1950℃。有毒,半數致死量(大鼠,經口)約1g/kg。。
用途:生化研究。氧化劑。有機反應催化劑。鋼鐵分析作稀土金屬標樣。氧化還原滴定分析。脫色玻璃。玻璃搪瓷遮光劑。耐熱合金。
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