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禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 11:08:07瀏覽次數:208

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50次
貨號 FS-P013449 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產品:二氫歐山芹醇當歸酸酯CAS:5058-13-9動物扁桃腺組織細胞分離培養試劑盒
干擾素誘導GTP結合蛋白MX2抗體動物腫瘤組織細胞分離培養試劑盒
吸水鏈霉菌人體NK細胞分離試劑盒
雞硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒樣本結晶紫細胞群落染色試劑盒

詳細介紹

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!

產品名稱

規格

貨號

禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013449

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。

11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

LFABP/FABP-2 /FITC 熒光標記肝臟型脂肪結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 STAT2/FITC 熒光標記信號轉導和轉錄激活因子2(STAT2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh AFP 甲胎蛋白AFP抗體  0.1ml

Rabbit  Guinea pig IgG/Bio 生物標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

Gibberellins 磺/β-基乙磺抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  dog IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗狗IgG  0.3ml

 STAT2/FITC 熒光標記信號轉導和轉錄激活因子2(STAT2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit 人促黃體Multi-class antibodies: 48T

 Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷化丙酮激M2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh KIF17 驅動蛋白家族KIF17抗體  0.2ml

T ELISA Kit 大鼠睪酮 96T

PTK9 蛋白酪激9抗體 0.2ml

phospho-CDKN2A (Ser8) 磷化抑癌基因p16抗體 0.1ml

 Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷化丙酮激M2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  rat IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗大鼠IgM 0.3ml

GAPDH 3-磷甘油脫氫(兔來源組化用抗體) 0.1ml

Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體  0.1ml

 IL-11/FITC 熒光標記白介11抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/HRP 辣根過氧化物標記兔抗人IgA  0.1ml

 Patched/PTCH /FITC 熒光標記Hh信號轉導途徑膜蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒丁香假單胞菌種屬: Pseudomonas│syringae分離基物: 天牛腸道提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 飼料用纖維、植、木聚糖等的篩選培養基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法

藤黃色土生單胞菌種屬: Terrimonas│lutea提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

串珠鐮孢種屬: FusariummoniliformeSheldon安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 九二0產生菌培養基: 14,17生長條件: 25-28℃

凝結芽孢桿菌種屬: Bacilluscoagulans分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: no培養基: 104生長條件: 37℃

原前體蛋白(PIVKA-II)ELISA試劑盒正  ACS, ≥99.5%2,7-二溴芴 98%睪酮,

原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒正 分析標準品1,4-二酞 98%睪酮(標準品)

(PT)ELISA試劑盒正 農殘級4,4'-二聯 98%鹽丁卡因

血栓調節蛋白復合物(T-TM)ELISA試劑盒 AR,≥99.5% (GC) 9-芴甲 99% 鹽丁卡因(標準品)

受體(TR)ELISA試劑盒 ≥99.5%, FCC, FG雙酚芴  98%甲唑啉鹽鹽/鹽妥拉唑林

敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒松油,異構體混合物,CP(R)-3-(3-氟基)-5-羥甲基惡唑-2-酮 98%托特羅定

抗復合物(TAT)ELISA試劑盒正戊 CP,98%(S)-N-[[3-(3-氟基)-2-氧代-5-惡唑基]甲基]乙酰 98%托特羅定(標準品)

(TM)ELISA試劑盒正戊  >99% (GC)高良姜 98%托吡酯

(Thrombin)ELISA試劑盒4,4,4-三氟乙酰乙乙酯 98%2-羥基-6-甲基吡 98%托吡酯(標準品)

凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒乙酰乙甲氧乙酯 96%4--1-甲基-1H-吡唑 97%VX-680/MK0457,陶扎色替

凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒石墨 99.95% metals basis4--1H-咪唑 97%曲司銨

凝聚(CLU)ELISA試劑盒石墨 99%,40nm1-(2-乙基)-2-甲基-5-硝基-1H-咪唑 98%AG-014699

凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒石墨 CP,99.85%1-甲基-D-色氨 96%卡非佐米

尿腫瘤壞死因子相關誘導凋亡配體死亡受體4(TRAIL-DR4)ELISA試劑盒石墨 D50<400nm,99.95%2-磺酰 98%CEP-18770

尿游離皮質(UFC)ELISA試劑盒石墨 99.95%,8000目(S)-2-硝基-6,7-二氫-5H-咪唑并[2,1-b][1,3]惡-6- 98%地馬格列

尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA試劑盒鐿 99.9%,塊狀吡唑-3-甲酰 97%鹽諾拉曲噻
PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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