小鼠纖維環細胞公司正在出售的產品：人非小細胞肺癌細胞；NCI-H358人非小細胞肺癌細胞；NCI-H1299人乳腺癌細胞；HCC1937人膠質瘤細胞；GOS-3人胰腺癌細胞系；SW1990小鼠皮膚黑色瘤細胞；B16-F人肝癌細胞；Hep3B2.1-7封閉蛋白12(CLDN12)ELISA試劑盒封閉蛋白11(CLDN11)ELISA試劑盒封閉蛋白10(CLDN10)ELISA試劑盒封閉蛋白1(CLD

一、細胞基本屬性

 

組織來源：椎間盤組織

種屬來源：小鼠

細胞簡介：纖維環，位于椎間盤的周緣部，由纖維軟骨組成，纖維環的纖維在椎體間斜行，在橫切面上排列成同心環狀，相鄰環的纖維具有相反的斜度，而相互交叉。纖維環細胞位于膠原纖維束之前，合成和分泌纖維環細胞外基質，維持正常的纖維環結構和功能。

培養基：原代軟骨細胞培養體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：多角形細胞，不規則細胞

傳代特性：根據細胞特性

消化液：0.25%胰dan白酶

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

二、細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法

小鼠纖維環細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈多角形細胞，不規則細胞，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；

3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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