詳細介紹
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規格 | 商品貨號 |
小鼠輸卵管平滑肌細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | A01X1873 |
組織來源:輸卵管組織
種屬來源:小鼠
細胞簡介:輸卵管是卵子運輸、儲存、獲能,以及卵母細胞采取、運送、成熟、受精和早期胚胎發育的重要場所。輸卵管與其他空腔器官相似,其管壁由內向外為粘膜層(tunica mucosa)、肌層(muscular layer)和漿膜層所構成。其中,肌層的結構和厚度因不同節段而有差異,峽部肌層厚,管腔亦小。
培養基:原代平滑肌細胞培養體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形細胞
傳代特性:根據細胞特性
消化液:0.25%胰dan白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
二、細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
三、使用方法
小鼠輸卵管平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形細胞,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內;
4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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