詳細介紹
參數規格:
產品貨號:FS-P013523
產品規格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
Langerin/CD207/FITC 熒光標記白細胞分化抗原CD207抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SPA-1/SIPA-1 熒光標記抗信號感應增殖相關蛋白 1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKAP2 蛋白激A2抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Bio 生物標記的兔抗馬IgG 0.1ml
Granzyme B 顆粒B抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPA-1/SIPA-1 熒光標記抗信號感應增殖相關蛋白 1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳脫氫Multi-class antibodies: 48T
Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-10 白細胞介-10抗體 0.1ml
BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白7 96T
Protein CASP CASP抗體 0.1ml
CK1 細胞角蛋白1抗體 0.1ml
Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey human IgG/RBITC 羅丹明標記的驢抗人IgG 0.1ml
GCP4 γ-微管蛋白GCP4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARMCX1 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體 0.2ml
IGF-II/FITC 熒光標記胰島樣生長因子-II抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG 兔抗猴IgG 1mg
Plexin A2/FITC 熒光標記神經叢蛋白A2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人皰疹病毒6型染料法熒光定量PCR試劑盒50次鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
多粘類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│polymyxa提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0002生長條件: 28-32℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
微黃色奈瑟氏菌種屬: Neisseria│subflava提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蛋白解誘導因子/皮離蛋白(PIF/DCD)ELISA試劑盒2,4-二甲基-1- 99%長春質 分析標準品,≥98%孔雀綠
蛋白激活復合體亞基2(PSME2)ELISA試劑盒3,4-二 99%三氧化鉬 99.95%聚乙二2000
蛋白3特異性抗中性粒胞質抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒4-硝基鄰二甲 99%三氧化鉬 99.95%,100nm硫代氨基脲(AR)
蛋白3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒3-硝基鄰二甲 99%二硫化鉬 AR,99%化亞鐵四(AR)
蛋白3(PR3)ELISA試劑盒草高鐵銨 98%鉬粉 99.5% metals basis,2μm烏來糖;氨乙酯
蛋白1調控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒硫亞鐵銨,六 AR,99.5%砷 99.995% metals basis鉬
蛋白(PP)ELISA試劑盒硫高鐵銨,十二 AR,99.0%砷標準溶液 濃度范圍:0.444(mg/L) ±0.028mg/L酮激
蛋白酪氨1B(PTP1B)ELISA試劑盒乙基纖維 電子級對氨基胂 98%甲磺依普羅沙坦;依普沙坦
蛋白酪氨(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒鞣花 96%對氨基胂 分析標準品鹽甲脒
蛋白酪氨激(PTK/CD115)ELISA試劑盒沒食子乙酯 98%三氧 AR(劇品)化鉻;三化鉻
蛋白酪氨激(PTK)ELISA試劑盒熒光 IND三氧 CP(劇品)肌一
蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒檸檬鐵 AR三氧 PT(劇品)右旋糖苷/葡聚糖10
蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒檸檬鐵 培養級三氧 99.99%(劇品)三(羥甲基)氨乙鹽
蛋白精氨脫亞氨4(PADI4)ELISA試劑盒硫鐵 AR,Fe 21-23 % 98%(劇品)檸檬鐵銨
蛋白精氨甲基轉移1(PRMT1)ELISA試劑盒硫亞鐵,七 ACS, ≥99.0%亞鈉 99.99%(劇品)化
蛋白激C(PKC)ELISA試劑盒石蕊 AR亞鈉 CP(劇品)D-葡萄糖內酯