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詳細介紹
中文名稱：Caspase 6 活性檢測試劑盒
英文名稱：Caspase 6 Activity Assay Kit
產品規格：20次|100次
發貨周期：1～3天
本試劑盒是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中caspase 6酶活性或純化的caspase 6酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時，除標準曲線外可以檢測20個樣品。 Caspase是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 6也稱Mch-2，有時被寫作caspase-6或caspase 6，最初從人的Jurkat細胞中被發現。Caspase 6的前體被granzyme B剪切后可以形成活化的caspase 6二聚體，而活化的caspase 6被發現可以誘導細胞凋亡。Caspase 6可以剪切PARP和keratin-18，也可以剪切細胞核核被膜上的關鍵組成蛋白Lamin A。Caspase家族中僅caspase 6可以剪切Lamin A。Caspase 6對于Lamin A的識別位點是VEID。本試劑盒利用了caspase 6對于VEID識別的特異性，設計了相應的caspase 6特異的顯色底物Ac-VEID-pNA。 |
本Caspase 6活性檢測試劑盒是基于caspase 6可以催化底物Ac-VEID-pNA(acetyl-Val-Glu-Ilel-Asp p-nitroanilide)產生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 6的活性。pNA在405nm附近有強吸收。
試劑盒中提供了caspase 6催化產生的黃色產物pNA，可以作為定量caspase 6酶活性的標準品。
試劑盒組分：
裂解液——————8ml
檢測緩沖液——————8ml
Ac-VEID-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
儲存條件：-20℃。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養基，并用新鮮培養基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
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其他植物血凝素
英文名稱：PHA
其他英文名稱：Phytohemagglutinin
產品規格：BR
包裝：1克
CAS號：9008-97-3
相對分子量：121000～132000
級別：BR
原理：PHA系有絲分裂原，可刺激T細胞在體外培養過程中轉化為體積較大的母細胞，核內生成核仁，部分細胞發生分裂
性狀：粉末
用途：生化研究。用于細胞體外培養；用于細胞功能及染色體的研究等。
保存：2～8°C，避光，有效期2年
操作規程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
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