化工儀器網
詳細介紹
參數規格：
產品貨號：FS-02R6422
產品規格：48T 0.2PCR管
產品分類：PCR-熒光探針法
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Mfn1/FITC 熒光標記線粒體融合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TNFAIP1/FITC 熒光標記壞死因子α誘導蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACE1/CD143 血管緊張轉換ACE1抗體 0.1ml
Rabbit Biotin/PE PE標記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
GPR58 G蛋白偶聯受體58抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Avidin/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗親和 0.1ml
TNFAIP1/FITC 熒光標記壞死因子α誘導蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 人封閉抗體Multi-class antibodies： 48T
IGFBP4/IBP4 胰島樣生長因子結合蛋白4抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAL T細胞成熟相關蛋白抗體 0.2ml
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
RET 指狀蛋白RET抗體 0.2ml
CEAcam8 癌胚抗原相關細胞粘附分子8抗體 0.2ml
IGFBP4/IBP4 胰島樣生長因子結合蛋白4抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
GRAMD2 GRAM結構域蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AFP(A4) 甲胎蛋白單克隆抗體(檢測) 0.2ml
Leptin receptor(long) /FITC 熒光標記瘦受體抗體(長)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗羊IgG 0.1ml
SSTR4/FITC 熒光標記生長抑受體4(SSTR4)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
水貂源性核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管豬靶向核糖核（TR）elisa檢測試劑盒
豬抗生長抗體（GHAb）elisa檢測試劑盒
豬GATA結合蛋白3（GATA3）elisa檢測試劑盒
豬接觸蛋白4（CNTN4）elisa檢測試劑盒
猴腦源性神經營養因子（BDNF） elisa檢測試劑盒
猴BCL2修飾因子（BMF）elisa檢測試劑盒
猴鈣敏感受體（CaSR）elisa檢測試劑盒
猴α2巨球蛋白（α2-M）elisa檢測試劑盒
猴δ樣蛋白1同源物（DLK-1）elisa檢測試劑盒
猴腎小球組織糖基化終末產物（GTEAGE）elisa檢測試劑盒
猴FMS樣酪3（Flt3）elisa檢測試劑盒
猴平滑肌肌動蛋白α2（ACTα2）elisa檢測試劑盒
豬趨化因子C-C-基元配體1（CCL1）elisa檢測試劑盒
豬蛋白酪磷受體B（PTPRB）elisa檢測試劑盒
豬上皮膜抗原（EMA）elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
化工儀器網