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對于重組人GDF3檢測流程你是否清楚

2022-1-20  閱讀(365)

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  重組人GDF3試劑盒具有的三種特性:
  靈敏度:最小的GDF-3 檢測濃度小于30pg/ml。特異性:可同時檢測重組或天然的人GDF-3。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。
  重組人GDF3其要求有哪些:
  1. 生物活性:進行相應(yīng)的體外或體內(nèi)活性檢測。
  2. 純度:應(yīng)用兩種方法分析產(chǎn)品純度。
  3. 真實性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實性。
  4. 內(nèi)毒素:kinetic LAL法檢測內(nèi)毒素。
  5. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,電泳檢測;必要時應(yīng)用HPLC定量標準蛋白溶液。
  6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。
  重組人GDF3檢測流程:
  1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。
  2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。
  3. 每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。
  4. 洗板:同前。
  5. 每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。
  6. 洗板:同前。
  7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。
  8. 每孔加入100ul終止液混勻。
  9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。

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