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纖連蛋白(Fibronectin)重組蛋白介紹

2022-9-1  閱讀(825)

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重組人纖維連接蛋白片段(Recombinant human fibronectin fragment,以下簡(jiǎn)稱Fibronectin)為一段人工重組蛋白,由574個(gè)氨基酸組成,分子量約為63kDa。

纖連蛋白(Fibronectin)包括三個(gè)功能區(qū) :

[1] C-Domain:細(xì)胞粘附區(qū)域,含RGD序列,又稱細(xì)胞結(jié)合域(central cell-binding domain)

[2] H-Domain:提供病毒粘附,又稱肝***脂結(jié)合域(heparin-binding domain)

[3] CS-1位點(diǎn):提供細(xì)胞粘附功能


纖連蛋白(Fibronectin結(jié)構(gòu)如下圖所示

Fibronectin·-1.png


纖連蛋白(Fibronectin應(yīng)用

1. 提高逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒的轉(zhuǎn)染效率

作用原理如下:

細(xì)胞表面VLA-4及VLA-5可分別與Fibronectin上的CS-1 位點(diǎn)及C-Domain結(jié)合,逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以與H -Domain結(jié)合。在經(jīng)Fibronectin包被的培養(yǎng)容器表面,細(xì)胞與病毒載體以高濃度共存,從而顯著提高病毒的轉(zhuǎn)染效率30~70%。


2. 促進(jìn)細(xì)胞黏連粘附及刺激細(xì)胞增殖

細(xì)胞的黏連是機(jī)體結(jié)構(gòu)得以維持、細(xì)胞生長(zhǎng)完成的必要條件,研究結(jié)果表明:Fibronectin作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),可以促進(jìn)細(xì)胞的黏連生長(zhǎng),使多種細(xì)胞的貼壁率達(dá)到90%以上(對(duì)照組為10%),細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)良好,細(xì)胞的代謝率增強(qiáng),DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成速度提高約5倍,細(xì)胞的集落率升高幾倍,原代培養(yǎng)的成活率明顯提高,細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間縮短。


同時(shí),F(xiàn)ibronectin能刺激細(xì)胞上千倍的增殖。作用原理是: Fibronectin和抗CD3抗體可分別與T淋巴細(xì)胞上的VLA和TCR結(jié)合, 兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通過Ras途徑刺激T細(xì)胞的增殖和分化,使其獲得上千倍的增殖。

3. 其它應(yīng)用

研究還證明,F(xiàn)ibronectin能提高細(xì)胞的融合率,縮短融合周期,可應(yīng)用于許多科研中,如應(yīng)用于細(xì)胞雜交瘤技術(shù)等。將Fibronectin涂到微球載體上作為細(xì)胞大量生產(chǎn)的介質(zhì),可以節(jié)省空間,節(jié)省原材料,成為應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞技術(shù)來生產(chǎn)新藥品的基礎(chǔ)物質(zhì)。


賽爾瑞成提供高品質(zhì)重組人Fibronectin,是在符合GMP標(biāo)準(zhǔn)要求的潔凈間由原核系統(tǒng)表達(dá)、經(jīng)分離純化和過濾除菌等步驟制成 ,分子量約為63.0 kDa。該產(chǎn)品具有高純度,高活性,低內(nèi)毒素的特點(diǎn) ,并通過 ISO9001、ISO13485質(zhì)量體系雙重認(rèn)證。

重組人Fibronectin產(chǎn)品特點(diǎn)

純化自重組 E.coli 菌株,其中攜帶有編碼人纖維連接蛋白片段的質(zhì)粒

無血清無動(dòng)物來源

內(nèi)毒素水平:<1 EU/μg

純度:經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測(cè)純度>95%


Fibronectin-3.png

生物學(xué)活性: 在促進(jìn)小鼠3T3細(xì)胞的粘附和增殖實(shí)驗(yàn)中,我公司生產(chǎn)的重組人Fibronectin表現(xiàn)出較好的促增值活性,結(jié)果如下圖所示:

Fibronectin-4.png

賽爾瑞成高品質(zhì)重組細(xì)胞因子

GMP條件生產(chǎn) | ISO9001、ISO13485質(zhì)量體系雙認(rèn)證 | 重組表達(dá)工藝

高純度>95%,高活性,低內(nèi)毒素<1EU/μg

賽爾瑞成技術(shù)團(tuán)隊(duì)常年從事抗體和重組蛋白的開發(fā)工作, 曾承擔(dān)國家“863"計(jì)劃項(xiàng)目、國家重大新藥創(chuàng)制項(xiàng)目、國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目、省級(jí)科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目等 ,每年為客戶提供200 多種重組蛋白和重組抗體定制服務(wù)。

目前,賽爾瑞成已研發(fā)出幾十種高品質(zhì)重組細(xì)胞因子, 產(chǎn)品均具有高純度>95%,高活性,低內(nèi)毒素<1EU/μg的特點(diǎn) ,已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)研究和工業(yè)化生產(chǎn)領(lǐng)域,并得到了大量客戶的認(rèn)可。


小圖.jpg



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