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    賽爾瑞成采用CRISPR/Cas9系統(tǒng),提供基因敲除細胞系構建服務。賽爾瑞成根據(jù)目的基因序列設計合成sgRNA,將Cas9和sgRNA基因轉(zhuǎn)染目的細胞,進而敲除目的基因,并進行單克隆篩選,獲得基因敲除單克隆細胞系。CRISPR/Cas9系統(tǒng)作為新一代基因編輯工具,因其構建方便、設計靈活,操作簡單、效率高成本低,成為基因敲除的新一代利器。該系統(tǒng)由有DNA切割活性Cas9蛋白和識別特異靶點的sgRNA組成。Cas9是一種核酸內(nèi)切酶,它和sgRNA構成的復合體能與DNA分子上的特定序列結合,并在PAM
  • 白介素15(IL-15)的作用機制、生物學功能及應用

    白細胞介素-15(interleukin-15,IL-15)是一種T細胞生長因子,于1994年被兩個獨立的實驗室發(fā)現(xiàn),與IL-2具有類似的生物學功能。IL-15主要由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生。人體多種組織表達IL-15mRNA,如心、肺、腎、尤其是胎盤和肌肉。細胞來源和靶細胞分布較IL-2廣,故可能在不表達IL-2的部位發(fā)揮類似IL-2的效應。IL-15的作用機制:IL-15Rα在人和小鼠中廣泛表達,IL-15信號通路的主要機制是IL-15與細胞上的IL-15Rα亞基結合后,IL-15停留在細胞表
  • 干貨| 細胞復蘇/凍存/傳代之實驗操作及注意事項

    一、細胞培養(yǎng)前期準備工作細胞培養(yǎng)儀器設備:◆細胞培養(yǎng)通風櫥(即生物安全柜)◆培養(yǎng)箱(通用推薦:濕式二氧化碳培養(yǎng)箱)◆離心機◆醫(yī)用冰箱(4℃)和冰柜(-20℃)、生物超低溫冰箱(-80℃)、液氮冷凍罐◆倒置顯微鏡其他用品:細胞培養(yǎng)容器(培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、多孔板等),吸管和移液器,培養(yǎng)基、血清和試劑注意事項:◆無菌工作區(qū)域:細胞培養(yǎng)實驗室的主要要求是需要維持細胞培養(yǎng)操作工作區(qū)域處于無菌狀態(tài),簡單經(jīng)濟的方式就是使用細胞培養(yǎng)通風櫥。◆無菌試劑和培養(yǎng)基:商品化試劑和培養(yǎng)基經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制以確保無菌,注意操
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    cDNA合成是基因表達研究的關鍵步驟,而逆轉(zhuǎn)錄酶(ReverseTranscriptase)的質(zhì)量和效率是產(chǎn)生穩(wěn)定完整cDNA的保證條件。低效的逆轉(zhuǎn)錄反應會降低cDNA產(chǎn)量和質(zhì)量,從而影響基因表達研究的靈敏性,甚至產(chǎn)生假陰性結果。因此,選擇高效穩(wěn)定的逆轉(zhuǎn)錄酶(ReverseTranscriptase)至關重要。賽爾瑞成提供CrgScriptⅠ和CrgScriptⅡ兩種逆轉(zhuǎn)錄酶,均屬于高效耐熱型逆轉(zhuǎn)錄酶,有更高的熱穩(wěn)定性。其在50°C時仍具有更高的熱穩(wěn)定性和更長的半衰期,并且RNaseH活性較低,
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    一、訂購賽爾瑞成提供多種大腸桿菌宿主菌,如需訂購,可提供兩種形式的宿主菌供您選擇:穿刺菌和甘油菌,貨期均是2-3天.穿刺菌制備方式:將菌種搖瓶活化(對數(shù)期),預先在1.5ml的EP管中加入半固體瓊脂培養(yǎng)基,把活化過的菌種用牙簽穿刺接種于半固體瓊脂培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)一個晚上即可。甘油菌制備方式:將菌種搖瓶活化,培養(yǎng)至對數(shù)期,取適量菌液于小管中,加入終濃度為10%-20%的滅菌甘油,混勻后即可,直接置于-80℃保存。二、運輸及保存方式穿刺菌的運輸及保存方式:2-8℃運輸,4℃冰箱保存一周。甘油菌的
  • 使用無血清細胞凍存液凍存雜交瘤細胞的優(yōu)勢

    在單克隆抗體的制備過程中,及時凍存原始孔的雜交瘤細胞以及克隆化得到的亞克隆細胞是十分重要的。因為在沒有建立一個穩(wěn)定分泌抗體的細胞系的時候,細胞的培養(yǎng)過程中隨時可能發(fā)生細胞的污染、細胞突變、分泌抗體能力的喪失等等。如果沒有原始細胞的凍存,則可能因上述意外而前功盡棄。因此,雜交瘤細胞的凍存在單克隆抗體制備過程中起著關鍵性作用。目前,雜交瘤細胞的凍存方法同其他細胞系的凍存方法是一樣的。傳統(tǒng)雜交瘤細胞的凍存:傳統(tǒng)細胞凍存液的組分:培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,或90%的血清+10%DMSO傳
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    Cellregen無血清細胞凍存液使用手冊可申請領取試用裝Cellregen無血清細胞凍存液介紹1.是一種通用型的細胞凍存液,可用于凍存人和各種動物細胞株;2.*凍存液配方,即開即用,方便快捷;3.非程序降溫,-80℃低溫冰箱凍存長達5年;4.特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力;5.不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全;6.可孔板(細胞培養(yǎng)板)凍存,可用于雜交瘤細胞的凍存液。Cellregen無血清細胞凍存液存儲條件儲存
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