綠色植物中葉綠素含量是測(cè)定植物所需氮含量的重要因素，是植物進(jìn)行光合作用的關(guān)鍵因素，因此對(duì)植物的生理學(xué)研究也是個(gè)重要的考核指標(biāo)。葉綠素測(cè)定儀通過(guò)測(cè)量葉片在兩種波長(zhǎng)范圍內(nèi)的透光系數(shù)來(lái)確定葉片當(dāng)前葉綠素的相對(duì)數(shù)量,也就是在葉綠素選擇吸收特定波長(zhǎng)光的兩個(gè)波長(zhǎng)區(qū)域，根據(jù)葉片透射光的量來(lái)計(jì)算測(cè)量值。
葉綠素測(cè)定儀的測(cè)定原理是根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過(guò)測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。
若測(cè)定葉綠體色素混合提取液中的葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可求得其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾，通常用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的大吸收峰。
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