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植物6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)ELISA試劑盒實驗使用說明書

時間:2025-4-10閱讀:77
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  以下是植物6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

  BS-5024  植物6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)ELISA試劑盒

  一、試劑盒基本參數

  規格?:常見為96T/48T兩種包裝?

  保存條件?:2-8℃避光保存,避免反復凍融?

  保質期?:通常為6個月?

  適用樣本?:血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清等生物液體?

  二、實驗前準備

  自備器材?:

  酶標儀(需支持340nm波長檢測)?

  離心機(8000g能力)?

  恒溫水浴鍋/培養箱(37℃)?

  微量移液器及無菌槍頭?

  樣本處理?:

  組織樣本?:按1:10比例(0.1g組織+1mL提取液)冰浴勻漿,8000g離心10min取上清?

  細胞樣本?:每500萬細胞加1mL提取液超聲破碎(功率20%,3s間隔10s,重復30次)?

  液體樣本?:血清/血漿可直接檢測,避免使用含NaN3的樣本?

  三、實驗操作流程

  試劑配制?:

  溶解凍干粉試劑(使用前加2mL蒸餾水現配現用)?

  工作液按試劑一:二:三=110:20:20比例混合?

  檢測步驟?:

  酶標儀預熱30分鐘,設置340nm檢測波長?

  每孔加入100μL樣本或標準品?

  37℃孵育30-60分鐘(具體時間參考各品牌說明書)?

  洗滌5次后加入底物顯色?

  四、注意事項

  避免樣本反復凍融?

  含NaN3的樣本會抑制HRP酶活性,需提前處理?

  建議先做2個樣本預實驗優化條件?

  不同物種(人/大鼠/植物等)需確認試劑盒適用性?

  五、結果計算

  通過標準曲線計算樣本中S6PDH濃度,單位通常定義為每分鐘催化生成1nmol NADPH的酶量為1個活力單位?。具體計算公式需參照試劑盒說明書?。

  (說明:不同品牌試劑盒可能存在操作細節差異,建議以實際購買產品的說明書為準?)

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