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MTT檢測實驗
一、實驗介紹:
MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲臜,用酶聯免疫檢測儀在568m波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。
二、實驗目的:
1.藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養的細胞毒性的測定;
2.細胞增殖及細胞活性測定。
三、實驗步驟:
四、實驗結果展示:
五、送樣運輸要求:
1 凍存細胞
凍存管寄送前,使用封口膜把凍存管口封嚴密,凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。
2 活細胞
使用T25瓶,瓶蓋無孔。
生長狀態良好的細胞,細胞密度在30%-40%為宜,寄送前,移去瓶內舊培養基,添加新培養基至瓶頸部,保留微量空氣,擰緊瓶蓋,并用封口膜密封,瓶身用75%表面消毒,把瓶用無菌袋或自封袋包裝,然后放置在適當的盒內,盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當溫度低于10度是要加保溫措施,如暖寶寶等。
細胞培養條件備注完整,如培養基,培養溫度,FBS用量等。
備注:運送時間原則在4天以內,如細胞生長速度快,則加入的培養基血清可以減半,細胞密度在20%-30%。
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