在進行細胞培養(yǎng)時，我們經(jīng)常會聽到一些專業(yè)名詞，原代培養(yǎng)是什么？什么是世代數(shù)？細胞系是什么？有限細胞系又代表的是什么？有的專有名詞搞不清楚的話，會對細胞培養(yǎng)過程也會有一定的影響。根據(jù)老師們的反饋，我們總結(jié)了以下容易混淆的概念供大家參考~

1原代培養(yǎng)（Primary culture）

開始于直接取自生物體的細胞、組織或器官的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。通常代表異質(zhì)細胞群，很難標準化和繁殖。它們的壽命一般有限，而且已知它們會隨著時間而改變其差異特征。

2傳代（Passage(Subculture)）

細胞從一個皿里轉(zhuǎn)移或傳代到另一皿里的過程稱為細胞傳代。這是一個操作行為，無法準確定義細胞分裂次數(shù)。

3傳代次數(shù)（Passage number）

一種細胞被傳代培養(yǎng)的次數(shù)稱為傳代次數(shù)。

4世代數(shù)（Generation number）

一種細胞所經(jīng)歷的細胞數(shù)量倍增次數(shù)稱為世代數(shù)。

5群體倍增時間（Population doubling time）

在對數(shù)生長期中期細胞數(shù)量翻倍所需要的時間間隔稱為群體倍增時間。

6群體倍增次數(shù)（Population doubling）

在培養(yǎng)過程中細胞所經(jīng)歷的細胞數(shù)量倍增次數(shù)稱為群體倍增次數(shù)。

7細胞系（Cell line）

原代細胞經(jīng)過第一次傳代后增殖的細胞稱為細胞系或亞克隆。隨著細胞的傳代，生長能力*強的細胞會占據(jù)優(yōu)勢，最終導(dǎo)致細胞群體在基因型和表現(xiàn)型上達到一定程度的均一性。

8細胞株（Cell strain）

細胞系通過選擇或克隆獲得的具有特征的細胞系稱為細胞株。與親代細胞系起始時相比，細胞株往往會獲得其他一些遺傳學改變。

9有限細胞系（Finite cell line）

通過傳代增殖但在體外只能增殖有限細胞數(shù)量的一種細胞稱為有限細胞系（通常60-70倍增次數(shù)）。

10衰老（Senescence）

與染色體端粒縮短相聯(lián)系的生物調(diào)控的增殖潛力損失稱為細胞衰老。存活的細胞也可能保留一些功能活性。

11永生化（Immortalization）

獲得無限的壽命，可能是細胞自發(fā)產(chǎn)生的，也可能是以轉(zhuǎn)染引起的。

12無限細胞系（Infinite/immortal/strain）

具有無限增殖能力的細胞系或細胞株稱為無限細胞系/連續(xù)細胞系。

13平板效率（Plating efficiency）

在傳代培養(yǎng)中產(chǎn)生集落的細胞的百分比稱為平板效率。如果每個集落都可以說是來自一個細胞，那么平板效率等同于克隆效率/集落形成效率。有時，平板效率被粗略地用來描述傳代培養(yǎng)后存活的細胞數(shù)量，但這被更好地稱為種子效率。

導(dǎo)致細胞污染的原因主要有以下幾方面：

環(huán)境：水浴鍋、培養(yǎng)箱水盤、細胞培養(yǎng)箱內(nèi)壁、超凈臺、桌面及試劑瓶身、細胞房空氣消毒。

操作：細胞復(fù)蘇、傳代、凍存等過程中也可帶入污染。

試劑：血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胰酶、輔助試劑、營養(yǎng)添加物等。

耗材：培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶、槍頭。

細胞本身：本身攜帶污染、細胞老化、分化等。

如何進行污染源排查？

*血清：其他試劑保持不變，僅更換血清。

*基礎(chǔ)培養(yǎng)基：其他試劑保持不變，僅更換基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

*PBS：其他試劑保持不變，僅更換PBS。

*胰酶：若細胞復(fù)蘇的很好，一傳代就污染，可以嘗試其他試劑保持不變，更換消化用胰酶，看細胞狀態(tài)。

細胞反復(fù)復(fù)蘇都會出現(xiàn)污染，那可保持培養(yǎng)體系不變，培養(yǎng)其他類型且適用于此培養(yǎng)體系的細胞，觀察是否有污染出現(xiàn)。整個營養(yǎng)體系：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、營養(yǎng)添加物都可使用控制變量法進行排查。

*耗材

培養(yǎng)基及輔助試劑等條件不變，使用新耗材（培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶、槍頭）培養(yǎng)細胞，觀察細胞是否有污染。

*細胞本身

細胞本身攜帶污染源。可對細胞進行無菌檢測（細菌、真菌、支原體）。

細胞分化，細胞一旦分化，很難逆轉(zhuǎn)，無法通過外界營養(yǎng)體系和生長條件的調(diào)整“*”。

*細胞老化：細胞一旦老化，是無法逆轉(zhuǎn)的。

因此，大家需要學會觀察細胞的形態(tài)并進行分析，可以按照這幾點進行控制變量排查，如若確認是細胞本身問題，若細胞本身不是很昂貴，建議丟掉重新培養(yǎng)，若較珍貴，污染后可嘗試根據(jù)污染種類選擇合適的抗生素進行殺滅，分化和老化是沒有辦法補救的。