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胎牛血清熱滅活是必須的嗎?
1)加熱可以滅活補體系統(tǒng),激活的補體可以刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞??蒲袑氉觽兛梢愿鶕?jù)自己的研究要求,決定是否對血清進行熱滅活。
2)胎牛血清在全部解凍后,進行輕微搖勻,放置56°C溫水浴中30分鐘即可滅活。在滅活過程中建議有規(guī)律的搖勻,使瓶內(nèi)血清受熱均衡。也可使用無菌的小量容器將血清分裝后,再進行熱滅活,但需要注意在分裝和熱滅活過程中防止污染。
3)若非必須,可以不需要做熱處理這一步。有實驗顯示,經(jīng)過正確熱滅活處理的血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或全部沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長速率的降低。而且經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。
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