細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中為什么會(huì)產(chǎn)生小黑點(diǎn)？

1、生產(chǎn)工藝 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中加入胎牛血清出現(xiàn)了小黑點(diǎn)，并且隨著培養(yǎng)過(guò)程小黑點(diǎn)越來(lái)越多，這與胎牛血清的生產(chǎn)工藝有很大關(guān)系。目前胎牛血清的生產(chǎn)主要有兩種工藝：① 自然凝聚生產(chǎn)獲得血清，該生產(chǎn)控制要求嚴(yán)格，自然凝集的胎牛血幾乎不會(huì)出現(xiàn)小黑點(diǎn)。② 離心生產(chǎn)血清，該工藝可能會(huì)導(dǎo)致小黑點(diǎn)的產(chǎn)生。

2、細(xì)胞老化在細(xì)胞的表面出現(xiàn)小黑點(diǎn)，表明細(xì)胞老化，在細(xì)胞間隙間出現(xiàn)的小黑點(diǎn)，說(shuō)明細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞碎片化，需要更換細(xì)胞或者更換等級(jí)更高的血清。

3、實(shí)驗(yàn)污染細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的小黑點(diǎn)也有可能是因?yàn)槌霈F(xiàn)了污染。當(dāng)有小黑點(diǎn)形成后判斷是細(xì)胞污染還是細(xì)胞碎片，首先通過(guò)在鏡下觀察小黑點(diǎn)運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，很多會(huì)動(dòng)的小黑點(diǎn)只是發(fā)生布朗運(yùn)動(dòng)的細(xì)胞碎片，而細(xì)菌在運(yùn)動(dòng)上則較為活躍和浮躁。然后判斷培養(yǎng)基的渾濁程度，如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。

如何避免胎牛沉淀出現(xiàn)及培養(yǎng)基中小黑點(diǎn)的生成？

采用正確的解凍方法1、2℃~8℃解凍；2、解凍的過(guò)程中間斷搖勻（隔一段時(shí)間輕柔搖勻）；3、室溫或者水浴溶解均易造成沉淀增多。

正確使用和保存

1、非必須不用熱滅活（熱滅活會(huì)使血清中部分蛋白質(zhì)變性析出，影響血清品質(zhì)）；2、不宜37℃預(yù)熱，血清和培養(yǎng)基通常室溫預(yù)熱即可；3、避免反復(fù)凍融；4、避免紫外線照射；5、避免2-8℃長(zhǎng)期保存，分裝后-