詳細介紹
細胞背景:
來源于一名 52 歲男性肥大細胞白血病患者的外周血樣本。該細胞有多重亞型分別為:HMC- 1 5C6 ,HMC-1.1 ,HMC-1.2 。廣泛用于人肥大細胞功能研究,因為它們表現出組織肥大細胞的許多關鍵特征,例如組胺、類ydbm、肝素和類似細胞表面抗原譜的表達 (1,2) 。受體las激酶 KIT 在肥大細胞上表達,在肥大細胞的增殖、 功能和存活中起重要作用。KIT 中的激活突變與肥大細胞生長失調有關,并與肥大細胞腫瘤和系統性肥大細胞增 多癥有關。據報道,HMC- 1 細胞系中存在兩個 KIT 激活點突變 。這兩種突變都將受體轉化為組成型las磷酸 化和活性狀態,導致生長因子非依賴性增殖。HMC-1.1 (HMC- 1(560)) 和 HMC-1.2 (HMC- 1(560,816)) 是 HMC- 1 細胞系的兩個變異亞系。HMC-1. 1 具有 V560G 突變,但不具有 D816V 突變。HMC-1.2 同時具有 V560G 和D816V 突變,并且表現出比 HMC-1. 1 更高的增殖率。有人認為,HMC-1.2 的較高增殖潛力可能歸因于 D816V 突變。
細胞特性:
形態:淋巴母細胞樣,懸浮生長。用途:僅供科研使用
培養條件:
1) 準備 IMDM培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 空氣,95%;二氧化碳,5% 。 溫度:37 攝氏度,培養箱濕度為 70%-80%
懸浮細胞參考:
大多數懸浮細胞對于環境比較敏感,建議一直維持高密度生長,一般情況下細胞密度維持在 1×10 5 到 1×10 6 個/mL(不同細胞對密度要求不同) 。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中 800-1000rpm,離心 5min,棄去 上清,補加 1-2mL 培養液后重懸混勻后將細胞懸液按 1:2 的比例(可以 1:1 分瓶)分到新 T25 瓶中,添加 5-6ml 按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按 1:2 和以上比例 進行。大多數血液類相關的懸浮細胞受運輸影響比較大,會出現一批死細胞,如果因此密度降低了,可以離心后 轉移至 T25 瓶中豎著培養,培養基添加 5ml 以提高總體密度,隔一天后觀察密度可以的話再補液 3ml 培養
基后 T25 瓶放倒,等沉淀穩定后觀察細胞密度,持續添加培養基等密度上升足夠傳代為止