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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
Rosetta-gami B 系列菌株來源于 Origami B 系列菌株，是集合了 BL21 系列，Rosetta 系列菌株和
Origami 系列菌株的優(yōu)點(diǎn)，極大的增強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的
真核細(xì) 胞蛋白的表達(dá)能力。Rosetta-gami B 系列菌株是來源于 Origami B 系列菌株，攜帶有 TrxB
和 Gor 基因 突變，提高含二硫鍵正確折疊 蛋白的高效表達(dá)。本菌株含有 pRARE 質(zhì)粒，能夠提
供原 Rosetta(DE3)宿 主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA
外，增加了真核細(xì)胞的在大腸 桿菌中的蛋白表達(dá)水平。在 thioredoxin reductase (trxB)和
glutathione reductase (gor)基因上同時含有突 變，這使得該菌株能夠更加高效的在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成
二硫鍵，有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。TrxB 和 Gor 基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡
那和四環(huán)素抗性，所以本菌株無法用于卡那和四環(huán)素抗性質(zhì) 粒的蛋白表達(dá)。Rosetta-gami B 感受
態(tài)細(xì)胞來源于含有 BL21 系列菌株中的 lacZY 基因突變，能夠通過 IPTG 高效控制目的基因的表
達(dá)。Rosetta-gami B 感受態(tài)細(xì)胞能夠用于氨k抗性和壯g霉素抗性質(zhì)粒的原核表達(dá)。
產(chǎn)品組成
組分
96146
Rosetta-gami B 大腸桿菌表達(dá)菌株
0.3mL 甘油菌
基因型：F - ompT hsdSB (rB -mB - ) gal dcm lacY1 ahpC gor522::Tn10 trxB pRARE (CamR , KanR ,
TetR )
基本信息：
抗
性 :
氯m素抗性（Chl）、卡那m素抗性（Kan）、四環(huán)素抗
性（Tet）
培 養(yǎng) 基 :
LB
菌 株 類 別 :
大腸桿菌表達(dá)菌株
培 養(yǎng) 條 件 :
37℃，有氧
質(zhì) 粒 轉(zhuǎn) 化 :
42℃熱激
保 存 方 式 :
20%甘油，-80℃
基 本 應(yīng) 用 :
蛋白表達(dá)
保藏條件：
-20℃保存（復(fù)溶液于 2-8℃保存）；
操作說明：
1.本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌時可以不用全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液
體培養(yǎng)即可。也可以全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會逐漸下降。
2.為保證菌種純正，避免其它細(xì)菌污染，盡量先劃平板，然后再挑單克隆菌落進(jìn)行后續(xù)操作。
冷凍管開封：用浸過 75%酒精的脫脂棉嚴(yán)格消毒冷凍管蓋。
菌株復(fù)溶：無菌環(huán)境中旋開裝有復(fù)溶液的滴瓶蓋，吸取 1ml 左右復(fù)溶液，加入到冷凍管中。輕輕
振蕩，使凍干菌株溶解呈懸浮狀。
菌株復(fù)壯：用無菌吸管吸取菌懸液，轉(zhuǎn)移到復(fù)溶液滴瓶中。做好標(biāo)識，在適宜溫度下培養(yǎng)。細(xì)菌
在 30-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24-48h，真菌在 23-28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24-72h（必要時，可適當(dāng)延長培養(yǎng)
時間）。
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