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詳細介紹
產品簡介
Tuner(DE3)菌株是 BL21 菌株的 lacZY 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突變株，此突變導致 IPTG 以均一
速度進入體系中大腸桿菌的每個細胞，產生更加嚴格、均一的濃度依賴。此菌株用于高效表達克
隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體 (如 pET 系列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA
聚合酶，該區整合于 Tuner 的染色體上，所以稱為 Tuner(DE3)，可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸
桿菌 RNA 聚合酶，可用于 pET 系列，pGEX，pMAL等質粒的蛋白表達。Tuner(DE3)感受態細胞由
特殊工藝制作，pUC18 質粒檢測轉化效率達 107 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Tuner(DE3)感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1 λ(DE3)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
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