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詳細介紹
產品簡介
Tuner 系列菌株是 lacZY 刪除的 BL21 突變菌株，其中 lacY 的突變使得 IPTG 能夠進入所有細胞的胞
內，從而使得蛋白的誘導水平具有 IPTG 的濃度依賴性。當與 pET 系列載體聯合使用時，可使蛋白
的表達量從低表達水平到超高表達水平的范圍內進行有效的調節；而在蛋白表達水平低的情況下，
目的蛋白可能會呈現更好的可溶性和活性。因此，Tuner系列菌株的蛋白表達水平可以通過IPTG濃
度來進行精確而嚴謹的調控。此外，Tuner 系列菌株還是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株。由于該
菌株不含有 λDE3序列，不表達 T7 RNA 聚合酶，因此不能用于 T7啟動子系列質粒的蛋白表達。經
pUC18 質粒轉化檢測，Tuner 感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Tuner
化學感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
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