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詳細介紹
產品簡介
Origami 2 系列菌株是由 K-12 菌株衍生而來，在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase
(gor)基因上同時含有突變，這使得該菌株能夠更加高效地表達含二硫鍵的蛋白。與 Origami 系列菌
株相比，Origami 2 對卡那抗生素敏感，因而能夠用于含卡納抗性質粒的轉化。該菌株攜帶的 gor
基因突變使得其和原來的 Origami(DE3)菌株一樣具有四環素抗性。該菌株含有溶源的 λDE3 序
列，可表達 T7 RNA 聚合酶，因而適用于 pET 系列及其他 T7 啟動子系列載體。該菌株含有的
pLysS 質粒（氯m素抗性）能夠產生 T7 溶菌m，可以有效降低目的蛋白的本底表達水平。pLysS
質粒的起始復制位點是 p15 Origin, 這使得該質粒能和 pUC-及 pBR322-的衍生質粒共存。經 pUC18
質粒轉化檢測，Origami 2 (DE3)pLysS 感受態細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分
Origami 2 (DE3)pLysS
感受態細胞
10 × 100μL
100 × 100μL
定制
基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F ’ [lac+ lacIq pro] (DE3) gor522::Tn10
trxB pLysS (CamR, StrR, TetR)
存儲條件
-80 ℃保存，請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pLysS 質粒外，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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