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W3110感受態(tài)

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  • 型號 CC96148
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2024-11-04 11:08:02瀏覽次數(shù):175

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產(chǎn)品簡介

K12 消除了 F 和 lambda 的一種野生型菌株,可作為大腸桿菌模式菌株使用。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢
測,W3110 感受 態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
W3110 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- lambda- IN(rrnD-rrnE)1 rph-1

詳細(xì)介紹

K12 消除了 和 lambda 的一種野生型菌株,可作為大腸桿菌模式菌株使用。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢
測,W3110 感受 態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 10cfu/μg DNA
產(chǎn)品組成
組分
W3110 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- lambda- IN(rrnD-rrnE)1 rph-1
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30min
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔


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