詳細介紹
產品簡介
Stbl4 電轉化大腸桿菌細胞是 Stbl2 細胞的衍生物,非常適合克隆不穩定插入物,如逆轉錄病毒序列、
直接重復序列和串聯陣列基因。此外, Stbl4 細胞可用于使用質粒衍生載體產生 cDNA 文庫,并能
夠吸收和維持大質粒(例如 50kb 粘粒和 100 - 200 kb P1 克隆)。Stbl4 細胞還含有一個 F’附加體,允
許它們作為單鏈 DNA 的宿主,如 M13mp 克隆載體。由于攜帶 lacZΔM15 突變,因此該菌可用于含
Xgal 和 IPTG 的瓊脂平板上菌落的藍/白斑篩選。mcrA 突變和 mcrBC - hsdRMS - mrr 缺失允許克隆甲
基化的基因組序列。最后,endA1 突變大大提高了質粒產量和質量。經 pUC18 轉化檢測,Stbl4 感
受態細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Stbl4
感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 galthi-1 supE44 λ- relA1 Δ(lac-proAB)/F' proAB+lacIqZΔM15
Tn10 (TetR)
存儲條件
-80 ℃保存,請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90 s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養基(室溫或37 ℃預熱),然后置于37 ℃搖床復壯45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。