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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
大腸桿菌 Mach1 T1 菌株由野生型 E. coli W 菌株改造而來，是目前生長速度較快的感受態(tài)細(xì)胞之一，
在平板上 培養(yǎng) 8 h 可見克隆；該菌缺失了核酸內(nèi)切酶（endA），提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量；
重組酶缺陷型（recA1398）減少插入片段的同源重組概率，保證了插入外源 DNA 的穩(wěn)定性；菌株
攜帶 lacZΔM15 突變，故可用于藍(lán)、白斑篩選；tonA 突變賦予 Mach1 T1 菌株對噬菌體 T1 和 T5 的
抗性。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測，Mach1 T1 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 109 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Mach1 T1
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR (rK- mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥109 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37 ℃預(yù)熱），然后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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