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  • 型號 CC96138
  • 品牌 其他品牌
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更新時間:2024-11-04 16:24:05瀏覽次數:95

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產品簡介

供貨周期 現貨    
INVαF′大腸桿菌允許高拷貝質粒的穩定復制;該菌株帶有 lacZ?M15突變,可以進行藍/白篩選實驗;
該菌株同時帶有 recA 和 endA1 突變,可顯著降低質粒的重組效率以及胞內核酸酶的含量,從而提
高質粒 DNA 的質量。此外,該菌株還可以利用攜帶 F1 復制起點的載體來生產 ssDNA。值得注意
的是,在進行藍白斑實驗時,無需添加 IPTG 誘導,只需要在平板上涂上 X-gal 即可。

詳細介紹

產品簡介
INVαF′大腸桿菌允許高拷貝質粒的穩定復制;該菌株帶有 lacZ?M15突變,可以進行藍/白篩選實驗;
該菌株同時帶有 recA 和 endA1 突變,可顯著降低質粒的重組效率以及胞內核酸酶的含量,從而提
高質粒 DNA 的質量。此外,該菌株還可以利用攜帶 F1 復制起點的載體來生產 ssDNA。值得注意
的是,在進行藍白斑實驗時,無需添加 IPTG 誘導,只需要在平板上涂上 X-gal 即可。INVαF′感受
態細胞經特殊工藝制作,pUC18 質粒檢測轉化效率>10cfu/μg DNA
產品組成
組分
INVαF′感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F′ endA1 recA1 hsdR17 (rK– , mK+supE44 thi-1 gyrA96 relA1 φ80 lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)
U169 λ
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔


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