Cell Cycle Chromobody Immunodetection Vector

Cell Cycle Chromobody Immunodetection Vector

使用細胞周期染色體體實時觀察細胞周期動力學

穩定表達與綠色熒光蛋白TagGFP2融合的細胞周期染色體的HeLa細胞系。

穩定表達與紅色熒光蛋白TagRFP融合的細胞周期染色體的U2OS細胞系

上面的面板顯示了細胞周期染色體抗體-GFP2在36小時的時間過程中清楚地跟隨細胞的過程，在此過程中細胞經歷了兩輪分裂。次分裂后，子細胞在10小時左右進入S期，顯示出PCNA的特征點狀模式。29小時標記顯示其中一個子細胞進入有絲分裂（前期），第二個緊隨其后的是在第30小時。對于活細胞成像，將細胞接種在ibidi µ-玻片中。時間序列是在配備有63x / 1.4 NA Plan-Apochromat油浸物鏡以及加濕，受溫度和CO2控制的活細胞室的旋轉圓盤顯微鏡（UltraVIEW VoX，PerkinElmer）上獲得的。TagGFP2用488 nm激光線激發通常在100-500 ms /圖像之間，激光強度設置為max。25％。每30分鐘以1000×1000像素的幀大小，100 nm的像素大小和400 nm的z步長大小記錄活細胞的共聚焦圖像z堆棧。所顯示的圖像是幾個Z軸中間部分的大強度投影。