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常溫細胞收貨當天處理方式

1.收到常溫細胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象。

2.鏡下觀察有無微生物污染現象，拍照記錄不同倍數鏡下細胞狀態和有無染菌現象，方便后續售后處理。

3.用 75%酒精擦拭瓶身，置于培養箱中靜置培養 2~4h 后進行傳代操作。

4.觀察細胞密度若超過 80%則可正常傳代處理(有的原代細胞不可傳代，請根據實際情況決定)，傳代推薦比例 1：2 到 1：3（按實際收貨細胞密度決定，若不確定可聯系技術支持）；若細胞密度不到 80%則可取出部分培養基留 6ml 左右原瓶培養基繼續培養，注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋；懸浮細胞注意離心所有培養基以收集細胞。

5.由于氣溫，運輸等影響造成貼壁細胞漂浮的，請將細胞離心收集后在離心管中消化后進行傳代（參考附件），或及時聯系技術支持進行指導傳代。

6.若觀察到異常或者對細胞有疑問，請及時跟代理商或者我們聯系；對于細胞培養操作及培養注意事項有疑問的，可跟我們的技術支持交流。

附:收到貼壁細胞漂浮處理方法（部分細胞由于貼壁松散，會出現運輸后漂浮，冬天氣溫低時也會出現細胞收縮漂浮，屬于不可避免因素，正確處理后都可以正常生長）

1、將培養瓶內所有培養基轉入無菌離心管，離心收集細胞（1200rpm 3min）去除舊培養基；

2、用 PBS 重懸細胞，將所有細胞收集到一個離心管中，再次離心（1200rpm 3min）去除 PBS；

3、加入 1ml 左右 0.25%重懸細胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養箱消化細胞，根據細胞特性決定消化時間（TM3、TM4、293 系列約 1~2 分鐘）；

4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散，迅速加入 3-5ml 含血清的培養基混勻以終止消化，離心（1200rpm 3min）去除；

5、加入 5ml 左右的細胞相應的培養基混勻，按比例接入無菌培養瓶/皿中；

6、顯微鏡下觀察看細胞是否成均勻分散的單顆細胞，若有 3-5 個成團的小細胞團可不用重新消化，使之貼壁后待細胞生長穩定后再消散細胞。

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