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上海富雨生物科技有限公司
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BEL7402/FU人肝癌氟尿

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更新時(shí)間:2025-04-24 10:44:53瀏覽次數(shù):75次

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細(xì)胞系特征細(xì)胞株名稱:BEL7402/FU人肝癌氟耐藥株種屬:人組織來(lái)源:肝癌生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)形態(tài)特征:上皮細(xì)胞微生物及支原體檢測(cè):陰性安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄

細(xì)胞系特征

                       

細(xì)胞株名稱:BEL7402/FU 人肝癌氟耐藥株

種屬:人

組織來(lái)源:肝癌

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特征:上皮細(xì)胞

微生物及支原體檢測(cè):陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件:

 

 

 

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640 +10%胎牛血清+2ug/ml  5-FU 

血清我們推薦用:

GIBCOFBS-10099-141HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

()如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細(xì)胞脫落后,加入2ml 以上培養(yǎng)基中止消化。

3. 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明,收到細(xì)胞后的次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(45X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?/span>10X20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。

4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。..

 

凍存方法:

  凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO

  儲(chǔ)存:液氮儲(chǔ)存

 

form a translocation complex that translocates protein substrates across the lysosomal

membrane to be degraded [56]. Macroautophagy is characterized by the generation of de    novo formed double-membrane vesicles (“autophagosomes") that enclose cytosolic content

and eventually fuse with the lysosome. Although CMA is also implicated in the regulation of T cell fate and function at least in part by degrading negative regulatorsofT cell activation

[57], we will focus this review on macroautophagy (from here on referred to as

autophagy"), due to more extensively established links between this form of autophagy and cellular metabolism in T cells.

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