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供貨周期	現(xiàn)貨	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,綜合

NCTC1469 小鼠正常肝細(xì)胞介紹：
Catalogue No.: C0973
Product Format: a T25 flask
Culture Properties：貼壁
Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Components

Item	Specifications
a T25 flask	2X106
Manual	1 copy

Tantibody-based medication, the immune checkpoint inhibitors.
Methods: Review of the scientific background and the published clinical trials on the activity and approval of immune checkpoint inhibitors for various tumor diseases.
Results: Immune checkpoint inhibitors function by activating T?lymphocytes during the priming (CTLA4) or

NCTC1469 小鼠正常肝細(xì)胞常溫細(xì)胞收貨當(dāng)天處理方式：

1.收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。

2.鏡下觀察有無(wú)微生物污染現(xiàn)象，拍照記錄不同倍數(shù)鏡下細(xì)胞狀態(tài)和有無(wú)染菌現(xiàn)象，方便后續(xù)售后處理。

3.用 75%酒精擦拭瓶身，置于培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 2~4h 后進(jìn)行傳代操作。

4.觀察細(xì)胞密度若超過(guò) 80%則可正常傳代處理(有的原代細(xì)胞不可傳代，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況決定)，傳代推薦比例 1：2 到 1：3（按實(shí)際收貨細(xì)胞密度決定，若不確定可聯(lián)系技術(shù)支持）；若細(xì)胞密度不到 80%則可取出部分培養(yǎng)基留 6ml 左右原瓶培養(yǎng) 基繼續(xù)培養(yǎng)，注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋；懸浮細(xì)胞注意離心所有培養(yǎng)基以收集細(xì)胞。

5.由于氣溫，運(yùn)輸?shù)扔绊懺斐少N壁細(xì)胞漂浮的，請(qǐng)將細(xì)胞離心收集后在離心管中消化后進(jìn)行傳代（參考附件），或及時(shí)聯(lián)系技術(shù)支持進(jìn)行指導(dǎo)傳代。

6.若觀察到異常或者對(duì)細(xì)胞有疑問(wèn)，請(qǐng)及時(shí)跟代理商或者我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)注意事項(xiàng)有疑問(wèn)的，可跟我們的技術(shù)支持交流。

附:收到貼壁細(xì)胞漂浮處理方法（部分細(xì)胞由于貼壁松散，會(huì)出現(xiàn)運(yùn)輸后漂浮，冬天氣溫低時(shí)也會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞收縮漂浮，屬于不可避免因素，正確處理后都可以正常生長(zhǎng)）。

方法：

1、將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)所有培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入無(wú)菌離心管，離心收集細(xì)胞（1200rpm 3min）去除舊培養(yǎng)基；

2、用 PBS 重懸細(xì)胞，將所有細(xì)胞收集到一個(gè)離心管中，再次離心（1200rpm 3min）去除 PBS；

3、加入 1ml 左右 0.25%重懸細(xì)胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養(yǎng)箱消化細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞特性決定消化時(shí)間（TM3、TM4、293 系列約 1~2 分鐘）；

4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞團(tuán)分散，迅速加入 3-5ml 含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化，離心（1200rpm 3min）去除；

5、加入 5ml 左右的細(xì)胞相應(yīng)的培養(yǎng)基混勻，按比例接入無(wú)菌培養(yǎng)瓶/皿中；

6、顯微鏡下觀察看細(xì)胞是否成均勻分散的單顆細(xì)胞，若有 3-5 個(gè)成團(tuán)的小細(xì)胞團(tuán)可不用重新消化，使之貼壁后待細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定后再消散細(xì)胞。

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