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kyse30 人食道癌細胞
【kyse-30; Kyse30; KYSE0030】 | |
l 細胞鑒定 | STR鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞背景 | 來自一名 64 歲日本男性在治療前從胸內中段食管切除的分化良好的侵襲性食管鱗狀細胞癌；從異種移植到無胸腺小鼠中的腫瘤細胞建立的細胞系；文獻中描述可在無胸腺小鼠中進行異源移植，并攜帶 p53 突變和 cERB B、MYC 和 CYCLIN D1 的擴增。 |
l 細胞特性
| 1） 來源：食道癌 2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長 3） 含量：>1x106 細胞數 4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途：僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件： | 1）準備1640 基礎培養(yǎng)基 (awcell-0002) 48% F-12 基礎培養(yǎng)基 (awcell-0006) 48% 優(yōu)質胎牛血清 （awcell-0500） 2% P/S青霉素-鏈霉素 （awcell-15140-122） 1% GlutaMAX-1谷氨酰胺 ( awcell-0900 ) 1% 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項：
| 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。 4）運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。 |
l 運輸形式： | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。 常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
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