主動溶劑調制提供了一種基于閥的方法來解決二維液相色譜中維 (1D) 與第二維 (2D) 溶劑系統不兼容的問題。
摘要
二維液相色譜 (2D-LC) 方法開發中的一項重大挑戰是維 (1 D) 與第二維 (2 D) 溶劑 系統不兼容。在充滿挑戰的分離系統組合中,2 D 中可觀察到流穿峰、峰展寬或變形 峰等體積過載效應。主動溶劑調制 (ASM) 提供了一種基于閥的方法來解決該問題, 可提高 2 D 中的分離度和靈敏度。本篇技術概述闡述了 ASM 的原理,并展示其在兩 種反相 (RP) 液相色譜分離組合及親水相互作用液相色譜 (HILIC) 和 RPLC 組合中發 揮的作用。
結論
2D-LC 方法開發中的一項重要挑戰是 1 D 與 2 D 溶劑系統不兼容。對于 1 D 洗脫液中的 分析物在 2 D 色譜柱中保留性較低的分離 系統組合,2 D 中可能會觀察到流穿峰、 峰展寬或變形峰等體積過載效應。主動溶 劑調制提供了一種基于閥的方法,在 2 D 色譜柱前用 2 D 流動相稀釋 1 D 洗脫液,解 決了這一問題,從而實現了 2 D 色譜柱頭 處的分析物集中。
在 PAH 的 RPLC-RPLC 分析中,未使用 ASM 時將出現 2 D 峰展寬和變形峰。在 ASM 稀釋因子為 2 的條件下使用 ASM 時,2 D 色譜柱頭實現分析物集中,從而獲 得了對稱的 2 D 窄峰。在多肽的 HILIC-RPLC 分析過程中,未使用 ASM 的2 D 中出現了多 肽的部分流穿。在 ASM 稀釋因子為 5 的條 件下使用 ASM 時,多肽實現了*保留。
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