土壤酸性轉化酶（Solid-Acid invertase, S-AI）試劑盒說明書
微量法100管/48樣
注 意 ：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
S-AI在pH 為4.5~5.0（酸性）條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代謝關鍵酶之一。
測定原理：
S-AI催化蔗糖降解產生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。
自備用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存;
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入25mL試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存;
試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存；
樣品處理：
新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干，過30~50目篩。
測定步驟和加樣表：
試劑名稱（μL） | 測定管 | 對照管 |
風干土樣（g） | 0.05 | 0.05 |
試劑一 | 400 | |
試劑二 | 400 |
混勻， 37℃準確水浴30min后，95℃水浴10min（蓋緊，以防水分散失），流水冷卻后
充分混勻（以保證濃度不變），10000g 25℃離心10min，取上清液
上清液 | 200 | 200 |
試劑三 | 100 | 100 |
混勻，95℃水浴10min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻， 510nm處，記錄各管吸光值A，如果吸光值大于2，可以用蒸餾水稀釋后測定(計算公式中乘以相應稀釋倍數)，ΔA=A測定-A對照。
S-AI活性計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0016x -0.001；x為標準品濃度（μg/mL），y為吸光值。
單位的定義：每天每g土樣中產生1mg還原糖定義為一個S-AI活力單位。
S-AI活力（mg/d /g土樣）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V反總÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)
V反總：反應體系總體積：0.4mL；T：反應時間，1/48d； W：樣本質量，0.05g；1mg=1000μg。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0008x -0.001；x為標準品濃度（μg/mL），y為吸光值。
單位的定義：每天每g土樣中產生1mg還原糖定義為一個S-AI活力單位。
S-AI活力（mg/d/g土樣）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V反總÷W÷T ÷1000=480×(ΔA+0.001)
V反總：反應體系總體積：0.4mL；T：反應時間，1/48d； W：樣本質量，0.05g；1mg=1000μg。
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