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大腸桿菌O抗原診斷血清說明書
【產品名稱】
通用名： 大腸桿菌O抗原診斷血清
英文名： Escherichia coli O antisera
【產品說明】
本套血清用于大腸桿菌O抗原的鑒定，是將大腸桿菌O抗原標準株經過培養，制備成滅活抗原，免疫家兔所得。本血清產品已經過吸附去除了非特異性凝集成分，具有效價高，特異性強的特點。
【規格】每種1瓶，每瓶1ml，均為使用液。
【使用方法】
1. 產品在使用前最好恢復溫度到室溫。
2. 由患者糞便或其他材料分離的革蘭氏陰性桿菌，經初步生化檢查，疑似大腸桿菌時，應先分別用各種多價血清做玻片凝集試驗，陽性反應時，再與相應的單價血清做玻片凝集試驗，作出診斷。在潔凈玻片上用接種環滴加兩滴彼此分離的生理鹽水。
3. 從營養瓊脂平板上挑取分純的菌落，分別與玻片上的生理鹽水混勻。
4. 用接種環滴加1～2滴血清（10-15ul）于玻片上一個菌落與生理鹽水的混合液中，另一個菌落與生理鹽水的混合液中加入一滴生理鹽水作為對照。
5. 用接種環分別混勻玻片上的兩種混合液。
6. 輕輕搖動玻片1分鐘，觀察。于1分鐘內呈2+及以上凝集現象為陽性，1分鐘內呈現2+以下凝集現象為陰性。
7. 凝集結果判斷標準如下：
反應強度 判別依據
4+ 反應澄清透明，凝集顆粒較多、較大
3+ 反應澄清透明，凝集顆粒較多、較小
2+ 反應有些混濁，但仍可見較多顆粒狀凝集
1+ 反應非常混濁，只有少許顆粒狀凝集
- 反應*混濁，未出現任何凝集
【其他所需材料】潔凈玻片、生理鹽水（0.85%的氯化鈉溶液）、接種環或移液器。。
【注意事項】 本產品只能作為大腸桿菌血清型判定的輔助方法，最終的判定需形態學、生化方法和血清學方法共同進行
本產品應避免冷凍。反復凍融會使血清產生沉淀。
本產品在保存過程中可能會產生渾濁或沉淀，這并不表示該產品已被污染。離心或者過膜去掉渾濁或沉淀后，可以正常使用。
本產品含有0.3%疊氮-化鈉作為防腐劑，丟棄時需倒入下水管，并用大量的水沖洗下水管。
若待檢菌株與本產品均無明顯凝集現象，應將可疑菌落經2YT固體斜面培養基培養12-16小時，用1ml生理鹽水洗下培養物，于121℃高壓15分鐘或水浴煮沸30分鐘，再進行血清凝集反應。
若對照呈現明顯凝集現象，說明所檢菌株為粗糙型，應重新選取其他菌落進行凝集反應。
【儲藏條件】2~8℃避光保存，在標明的有效期內使用。
【有效期】24個月。
【參考文獻】《中國生物制品檢定規程》
Ewing.W.H. Edwards & Ewing’s Identification of Enterobacteriaceae.
Carpenter K.P. (1968) Association of Clinical Pathologists Broadsheet 60.
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