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J774 小鼠巨噬細胞
Product Format: a T25 flask
Culture Properties：半貼壁(貼壁弱，不需要胰-酶消化)
Complete Growth Medium: DMEM/F12+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Components
Item | Specifications |
a T25 flask | 2X106 |
Manual | 1 copy |
細胞培養操作步驟
輕輕吹勻細胞，收集懸液1000rpm(150g左右)離心3min，棄上清；
用新的*培養基重懸細胞，均勻分為幾份，接種到新的培養瓶中，并補加足量的*培養基(建議T25瓶加10-12ml*培養基，10cm皿加12-15ml)；（細胞比較依賴細胞密度，細胞傳代前及傳代后密度不宜過低，過低可能會導致細胞生長緩慢或者死亡。細胞傳代前培養基不能*變黃，不然細胞狀態變差會導致傳代失敗。傳代過程吹打細胞應盡量輕柔，不應吹出過多氣泡。）
將細胞放回37度培養箱繼續培養。傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
細胞冷凍保存
1.凍存液：92%*培養基+8%DMSO（可以根據實驗室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。
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