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J774A.1 小鼠單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞

Product Format: a T25 flask

Culture Properties：半貼壁(貼壁弱，不需要胰-酶消化)

Complete Growth Medium: H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components 

細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟

1. 輕輕吹勻細(xì)胞，收集懸液1000rpm(150g左右)離心3min，棄上清；

2. 用新的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，均勻分為幾份，接種到新的培養(yǎng)瓶中，并補(bǔ)加足量的*培養(yǎng)基(建議T25瓶加10-12ml*培養(yǎng)基，10cm皿加12-15ml)；（細(xì)胞比較依賴細(xì)胞密度，細(xì)胞傳代前及傳代后密度不宜過(guò)低，過(guò)低可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢或者死亡。細(xì)胞傳代前培養(yǎng)基不能*變黃，不然細(xì)胞狀態(tài)變差會(huì)導(dǎo)致傳代失敗。傳代過(guò)程吹打細(xì)胞應(yīng)盡量輕柔，不應(yīng)吹出過(guò)多氣泡。）

3. 將細(xì)胞放回37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。

細(xì)胞冷凍保存

1.凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過(guò)夜后液氮保存。

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