Anti-HA 磁珠
MCE 國際站：Anti-HA Magnetic Beads (1 μm)
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件：4°C 2 年
簡介：MCE Anti-HA Magnetic Beads (1 μm) 用于細菌和哺乳動物細胞裂解物以及體外表達系統中 HA 標記蛋白的免疫沉淀（IP）實驗。
概述：MCE Anti-HA Magnetic Beads 由高質量的鼠源 IgG3a 單克隆抗體與氨基磁珠共價偶聯制備，具有較高的 HA 標簽融合蛋白加載容量 ( >0.6 mg 蛋白/mL)，可用于細菌和哺乳動物細胞裂解物以及體外表達系統中 HA 標記蛋白的免疫沉淀 ( IP )。本產品可以通過磁力架 ( MCE 產品目錄號: HY-K0200 ) 或自動分離儀器分離，實驗便捷有效。本產品蛋白核載量高，特異性強，也可用于免疫共沉淀 ( Co-IP ) 和小量的蛋白質純化。
描述：
抗HA磁珠基于羥基磁珠，粒徑為1μm，與高質量鼠IgG3a單克隆抗體共價偶聯，該單克隆抗體可識別源自人流感血凝素（HA）蛋白的HA表位標簽（YPYDVPDYA）。
免疫沉淀過程中，僅需少量磁珠，非特異性結合率低。
• 方便省時。
• 非特異性結合率低。
• 樣品損失極小。
• 蛋白結合能力高達0.6mg/mL。
• 穩定，一瓶解決方案。
操作說明：1. 磁珠預處理混懸 Anti-HA Magnetic Beads，取 10 μL 磁珠，置于 1.5 mL EP 管中，加入 500 μL 洗滌緩沖液，充分混懸，置于磁力架上磁性分離，棄上清。重復以上洗滌步驟 2 次。2. 樣品的結合在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 細胞裂解液，充分混懸，置于翻轉混合儀孵育，室溫孵育 2 小時或者 4°C 條件下孵育過夜。置于磁力架上磁性分離，棄上清。注意：結合過程中，磁珠可能會出現聚團或呈片狀，屬于正常現象，不會影響實驗結果3. 洗滌在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 洗滌緩沖液，充分混懸磁珠，磁性分離，棄上清。重復以上洗滌步驟 3 次。4. 洗脫本說明書提供三種 HA 標簽蛋白洗脫方案，操作者可以根據后期檢測的需要選擇不同的洗脫方案。a. 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 50 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻，95°C 加熱 5 分鐘。分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，進行 SDS-PAGE 檢測。b. 酸性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有生物活性，可用于后期功能分析。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 50 μL 的洗脫緩沖液 A 混合均勻，室溫孵育 10 分鐘。分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，按每 50 μL 洗脫液加入 25 μL 中和緩沖液的比例加入中和緩沖液，將洗脫產物 pH 調節至中性，樣品用于后期功能分析。c. 競爭性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有生物活性，可用于后期功能分析。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 3-5 倍磁珠體積的洗脫緩沖液 B混合均勻，室溫孵育 1 小時或者 4°C 條件下孵育 1-2 小時。分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，即為目的蛋白，樣品用于后期功能分析。
注意事項：1. 本產品 pH 值為 6-8，禁止凍結。2. 本產品應避免離心、干燥或凍存，禁止長時間置于磁場，可能會引起磁珠聚團，樣品結合后操作過程應輕柔，避免抗原脫落。3. 使用本產品進行 IP 實驗前，需先確認樣品中 HA 融合蛋白的表達情況。4. 為最大限度的降低蛋白質降解，請配合使用 MCE 蛋白酶抑制劑 Cocktail (MCE 產品目錄號：HY-K0010，HY-K0011) 。5. 不要使用含 dithiothreitol (DTT) 的細胞裂解液樣品，DTT 可能會引起磁珠上的 HA 抗體脫落。6. 本產品僅用于專業人員的科學研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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