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SYBR Green qPCR 預混液

MCE 國際站：SYBR Green qPCR Master Mix (Universal)

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件： -20°C 2 年避光保存，避免反復凍融。

簡介：MCE SYBR Green qPCR Master Mix (Universal) 是一款適用于所有 qPCR 儀的 2× 濃度即用型預混液。采用新型抗體法熱啟動 DNA 聚合酶，配合 PCR 反應促進因子及比例優化的 Buffer 體系，實現高特異性、高靈敏度的 qPCR 檢測。

概述：本產品是一種采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進行 Real Time PCR 的 2× 濃度的 Premix Type 試劑。本品中含有 Real Time PCR 反應需要的合適濃度的 SYBR Green I，抗體法修飾的熱啟動 Taq DNA 聚合酶，PCR 反應促進因子及適合 Real Time PCR 的 Buffer 組合，可以有效抑制非特異性的 PCR 擴增，大大提高 PCR的擴增效率，適合進行高靈敏度的 Real Time PCR 擴增反應。本產品適用于快速 Real Time PCR 擴增反應，可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線，對靶基因進行準確定量、檢測，重復性好，可信度高。本產品預先混有 Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 熒光染料、穩定劑和鎂離子等通用組分，只需加入模板、引物、雙蒸餾水便可進行 Real Time PCR 反應，操作簡單方便。本品含有校正染料，與一系列 qPCR 設備兼容，包括需要 ROX 校正的儀器，實驗中無需額外添加染料校正儀器。

描述：

SYBR Green qPCR Master Mix (Universal) 采用特殊的性能增強型抗體介導的熱啟動 Taq DNA 聚合酶和優化的 qPCR 緩沖系統來執行基于 SYBR Green I 的定量 PCR (qPCR)。MCE qPCR Master Mix 是一種易于使用的穩定 2× 配方，包含除樣本 DNA、引物和水之外的所有 qPCR 成分。熱啟動聚合酶、MgCl₂、dNTP 和專有反應緩沖液可在 qPCR 實驗中產生最佳結果。此外，該產品具有的參考染料，可與所有 qPCR 儀器兼容。

1. 性能增強型抗體介導的 Taq DNA 聚合酶。

2. 參考染料與所有 qPCR 儀器兼容。

3. 優化的緩沖液可增強特異性并減少引物二聚體的形成。

4.敏感性、特異性和可靠性高。

操作說明：1. 配置反應體系建議的模板量 10-100 ng (基因組 DNA)或 1-10 ng (cDNA 模板)。配制 PCR 反應液 (反應液配制請在冰上進行)注：a. 通常引物終濃度為 0.2 μM 可以得到較好的結果。反應性能較差時，可以在 0.1~1.0 μM 范圍內調整引物濃度。b. 在 20 μL 反應體系中，DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同種類的 DNA 模板中含有的靶基因的拷貝數不同，必要時可進行梯度稀釋，確定合適的 DNA 模板添加量。2. 進行 Real Time PCR 反應建議采用下列圖表顯示的兩步法 PCR 反應程序，如果該程序得不到良好的實驗結果時，再進行 PCR 條件的優化。由于使用 Tm 值較低的引物等原因，兩步法 PCR 反應擴增性能較差時，可以嘗試進行三步法 PCR 擴增反應。注：a. 95°C 加熱 30 sec 激活熱啟動 DNA 聚合酶。b. 根據引物的 Tm 值設定退火&延伸（退火）的溫度；若擴增片段小于 200 bp，退火&延伸（延伸）時間設為 15 sec。此外，需根據所使用 qPCR 儀的最短數據采集時間調整退火&延伸（延伸）時間。c. 不同 qPCR 儀的熔解曲線采集程序有所區別，一般可使用儀器默認的熔解曲線采集程序

注意事項：1. 使用前，請上下輕輕顛倒混勻，避免產生氣泡，防止因混合不均勻造成的反應效果不佳。a. 請勿渦旋振蕩混勻。b. SYBR Green qPCR Master Mix (Universal) 在 -80°C 存放可能會產生白色或淡黃色沉淀，用手握緩慢溶解，于室溫短時間避光放置，輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。c. 沉淀會導致溶液成分不均勻，使用前務必充分混勻試劑。2. 配制反應液時，試劑請于冰上放置。3. 本制品中含有熒光染料 SYBR Green I，配制 PCR 反應液時避免強光照射。4. 反應液的配制、分裝請一定使用新(無污染)槍頭、Microtube 等，避免污染。5. 本制品中含有 Universal 校正染料，適用于所有機型，無需額外校正儀器。6. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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