植物組織樣本ELISA檢測處理方法

植物樣本處理方法

一、組織勻漿的制備： 

1、取組織塊（0.1g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重，放入5ml的勻漿管中。 

2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。 

3、勻漿的方式：手工勻漿，機器勻漿。 

① 手工勻漿：左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次（6～8分鐘），充分研碎，制成10%的勻漿液。 

② 機器勻漿：用組織搗碎機10000～15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿，也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備（勻漿時間10秒/次，間隙30秒，連續(xù)3～5次，在冰水中進(jìn)行,可適當(dāng)延長勻漿時間），鏡檢觀察:

4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機3000轉(zhuǎn)/分左右,離心10～15分鐘，取上清液進(jìn)行測定.

二、勻漿介質(zhì)：

 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。

三、樣本保存:         

植物組織樣本暫時不測定，可立即低溫凍存，溫度越低越好，中間如不-反-復(fù)凍融，-20℃以下可保 存三個月,-70℃以下可保存六個月