目錄:柏萊源（天津）生物科技有限公司>>生物試劑>>PCR>> SF2131.1×S4 Fidelity PCR Mix（dye-）
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 5× 1.125 mL |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業(yè) |
產品特點
? 操作簡單：1.1×即用型預混液，無需添加ddH2O，大程度地減少實驗步驟；
? 高保真：保真度為野生型Taq酶的30倍；
? 極快的延伸速度：10~15 s/kb；
? 超高的耐熱性能：98℃熱處理1 h后聚合酶活性無明顯變化。
產品簡介
1.1×S4 Fidelity PCR Mix（dye-）為1.1×即用型快速PCR預混液，內含S4 Fidelity DNA polymerase、dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系，只需添加引物和模板即可進行擴增，可有效擴增5 kb以內的DNA片段。
該酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，擴增產物為平末端，可直接用于平末端克隆。
產品組成
組分 | 規(guī)格 |
1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-) | 5×1.125 mL |
保存條件
-20℃保存 24 個月
適用范圍
本產品適用于以試劑盒提取的基因組 DNA、cDNA 和質粒 DNA 的 PCR 擴增，如基因鑒定、基因克隆等實驗。
注意事項
本產品為 1.1×PCR 預混液，無需額外添加 ddH2O。每次反應中該產品用量至少應占到總反應體積的 85%，50 μL 體系至少使用 43 μL PCR Mix，25 μL 至少使用 21 μL PCR Mix；
請使用高質量的模板進行擴增，如試劑盒提取的基因組 DNA。請勿使用 dUTP 或含U嘧啶的引物與模板；
3. PCR Mix 應避免反復凍融，短期內多次使用可置于 4℃保存。
常見問題與解決辦法
Q1：擴增無產物或產物量少？
A1：
1) 模板降解或模板純度差。電泳檢測模板質量，使用高質量模板；
2) 模板濃度過低。適當增加模板用量；
3) 引物不合適。優(yōu)化引物設計；
4) 退火溫度不合適。設置退火溫度梯度，摸索合適的退火溫度；
5) 循環(huán)數過少。適當增加 5~10 個循環(huán)；
6) 延伸時間不足。復雜模板可適當增加延伸速度至 20~30 s/kb。
Q2：擴增出現非特異條帶或彌散帶？
A2：
1) 引物特異性差。優(yōu)化引物，避免非特異性條帶以及引物二聚體的擴增；
2) 引物濃度過高。降低引物濃度；
3) 模板過量或純度差。減少模板量，使用高質量模板；
4) 退火溫度過低。適當提高退火溫度或使用 Touchdown PCR 程序；
5) 循環(huán)數過多。減少循環(huán)數至 25~30 cycles。
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