目錄:上海博盛龍生物科技有限公司>>實驗試劑>>其他試劑>> 慢病毒濃縮試劑
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50ml |
---|---|---|---|
貨號 | BF06205 |
一、產品描述
本慢病毒濃縮試劑為5×濃縮液,可以對慢病毒顆粒進行簡單快速的濃縮。該試劑操作簡單,僅需將5×濃縮液與慢病毒上清按比例混合并孵育一段時間,正常轉速離心,即可得到濃縮的慢病毒顆粒,回收率高達90%以上,可提高100倍病毒滴度。
二、慢病毒濃縮試劑操作步驟
1.收集細胞培養上清液,0.45μm濾膜過濾,去除細胞和碎片。
【注】:濾膜過濾需使用低蛋白吸附的纖維素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。切忌用硝酸纖維素膜(NC)。
2.將慢病毒上清液與試劑盒中的濃縮液按照體積比4:1的體積混合(上清液4份,濃縮液1份),混勻后4℃靜置,每隔30min混勻一次,混勻共進行3次。4℃孵育2h或過夜。
【注】:延長孵育時間可以提高回收率。慢病毒顆粒在4℃可以穩定保存數天。
3.4℃,4000g離心30min。
4.小心去除上清,不要劇烈晃動管子,一般可見白色沉淀(有時沉淀不可見)。
5.用初始體積(原上清液體積)1/10 - 1/100的DMEM或PBS重懸病毒顆粒,小心吹打均勻,重懸沉淀物。
6.重懸后的病毒以50µl/管分裝,-80℃冰箱保存。
【注】:慢病毒凍存液避免反復凍融,否則會降低病毒滴度。