微重力3D旋轉細胞培養系統通過模擬微重力或超重力環境,為細胞和組織研究提供了更接近體內生理狀態的實驗條件。該系統在再生醫學、腫瘤研究、藥物篩選等領域應用廣泛。本文從設備組成、操作流程、注意事項等方面,為新手提供一份詳細的操作指南。
一、系統組成與安裝
1. 核心組件
- 控制器:用于設置旋轉模式、速度、重力參數等,通常配備觸屏操作界面。
- 回旋主機:放置在培養箱內的核心部件,通過多軸旋轉模擬微重力或超重力環境。例如,北京基爾比生物公司研制的 Kilby Gravite系統通過兩軸旋轉實現10?3g的微重力模擬,而超重力模式可達到2-5g。
- 培養容器(可以定制搭載架):支持T25透氣型培養瓶(標配12個)、灌流器官芯片、定制化支架或轉壁式EP管生物反應器,適用于懸浮或貼壁細胞培養。
2. 安裝步驟
- 培養箱內擺放:確保旋轉座與培養箱內壁至少保留10cm間隙,避免運動部件碰撞。
- 連接電纜:使用配套扁平電纜連接控制器與主機,注意接口防塵。
- 電源要求:輸入電壓需為220V交流電,避免因電壓不穩導致設備故障。
二、基本操作流程
1. 參數設置*
- 重力模式選擇:
- 微重力:選擇兩軸旋轉模式(如1-4rpm),可模擬國際空間站級的10?3g環境。
- 超重力:單軸旋轉模式(如2-5g),適用于研究細胞在高壓環境下的響應。
- 程序預約:通過觸屏設置定時啟動、旋轉速度梯度變化等復雜程序。
2. 培養容器準備
- 懸浮細胞培養:使用T25培養瓶或轉壁式EP管反應器,確保培養基充注量,避免旋轉時溢出。
- 3D球體培養:優化細胞密度(如5×103~1×10? cells/mL),添加低血清培養基以減少貼壁生長干擾。
3. 系統啟動與監測
- 實時重力監測:通過重力傳感器查看X/Y/Z軸重力數值(精度±0.001G),確保實驗條件穩定。
- 環境兼容性:系統支持37°C、5% CO?培養箱環境,需提前校準溫濕度參數。
三、關鍵注意事項
1. 安全操作
- 避免電磁干擾:控制器需遠離強磁場環境,防止觸屏失靈或數據異常。
- 運動部件檢查:啟動前確認旋轉框無阻擋,防止機械故障。
2. 實驗優化建議
- 細胞類型適配:貼壁細胞需預涂基質膠(如Matrigel),而懸浮細胞可直接使用轉瓶培養。
- 動態環境模擬:可以結合微流控芯片或低氧培養箱,可進一步模擬腫瘤微環境中的氧梯度或藥物滲透差異。
3. 維護與校準
- 定期清潔:用75%酒精擦拭旋轉座表面,防止污染。
- 傳感器校準:定期進行一次重力傳感器校準,確保數據準確性。
四、常見問題與解決方案
1. 細胞聚集不均:可能因轉速過高或細胞密度不當,可調整至低速模式(如1-2rpm)并優化接種密度。
2. 重力數據異常:檢查傳感器連接是否松動,必要時重啟系統并重新校準。
3. 培養瓶漏液:確認瓶蓋密封性,避免使用破損容器;超重力模式下建議減少培養基體積。
五、新手進階建議
1. 培訓資源:多數品牌提供免費操作培訓(如(Rotary Cell Culture System,RCCS)生產制造商北京基爾比生物科技有限公司),建議參與以掌握高級功能。
2. 文獻參考:查閱系統配套案例(如胚胎干細胞微重力分化研究),學習參數設置經驗。
3. 小試實驗:第一次使用建議從小規模培養開始,逐步優化轉速、重力模式等參數。
通過以上操作指南,新手可快速掌握微重力3D旋轉細胞培養系統的核心功能與實驗技巧。更多技術細節可參考廠商提供的說明書或聯系技術支持(如(Rotary Cell Culture System,RCCS)生產制造商北京基爾比生物科技有限公司)。
附:
北京基爾比生物公司——微重力旋轉細胞培養系統(rotary cell culture system,RCCS)
Kilby 3D-clinostat 三維旋轉儀,
Kilby Gravite 微/超重力細胞旋轉培養系統,
3D回轉重力環境模擬系統,隨機定位儀,
類器官芯片搖擺灌注儀,
Kirkstall 類器官串聯芯片灌流仿生構建系統
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