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賽默飛 Countess 3 FL自動細胞計數儀使用教程

2025-1-24  閱讀(176)

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賽默飛 Countess 3 FL 自動細胞計數儀 是一款高精度、自動化的細胞計數和分析工具,結合了熒光顯微鏡技術和先進的圖像分析功能。以下是使用 Countess 3 FL 自動細胞計數儀的詳細教程,幫助用戶快速上手并有效利用儀器進行細胞分析。

1. 開始前準備

在使用Countess 3 FL之前,確保儀器和樣本準備好。

1.1 儀器準備

  1. 接通電源:確保儀器連接電源,并開啟電源按鈕。

  2. 檢查儀器狀態:在儀器啟動后,等待系統自檢完成。此時屏幕上會顯示儀器的歡迎界面,確認沒有錯誤提示。

  3. 清潔樣本腔和顯微鏡鏡頭:使用適當的清潔工具(如無塵布和清潔液)清潔儀器的顯微鏡鏡頭和樣本腔,避免灰塵影響結果。

1.2 樣本準備

  1. 準備細胞懸液:確保細胞懸液均勻,必要時使用離心機沉淀細胞,去除上清液。

  2. 選擇適當的染料:根據需要使用臺盼藍或熒光染料(如Calcein-AM、PI等),將染料加入細胞懸液中,幫助區分活細胞與死細胞。

2. 操作步驟

2.1 啟動儀器

  1. 打開 Countess 3 FL,并觸摸屏幕上的 "Start" 按鈕進入主菜單。

  2. 在主菜單中,選擇適合你實驗的計數模式(如臺盼藍染色、熒光染料分析等)。

2.2 樣本加載

  1. 將準備好的細胞懸液輕輕滴入計數板或樣品腔。確保液體的表面平整,避免氣泡干擾。

  2. 使用Countess 3 FL的專用樣品腔蓋住樣品,確保沒有氣泡。插入樣品腔到儀器的掃描區域。

2.3 設置計數參數

  1. 選擇適合的實驗模式:

    • 普通細胞計數模式:選擇“臺盼藍"或其他染料檢測活死細胞的模式。

    • 熒光染料模式:如果使用了熒光染料(如Calcein-AM、PI等),選擇相應的熒光通道(如綠色或紅色),以便通過熒光信號分析細胞活性。

  2. 調整其他實驗設置(如增益、曝光時間等),以確保熒光信號清晰可見,細胞圖像清晰。

2.4 運行計數

  1. 按下 “Start Counting" 按鈕,儀器將自動開始圖像采集與分析。Countess 3 FL會掃描樣品中的細胞圖像,并進行自動識別和計數。

  2. 在分析過程中,Countess 3 FL會自動顯示細胞數量、活細胞和死細胞的比例、細胞大小分布等數據。

2.5 查看分析結果

  1. 分析完成后,儀器會自動生成詳細的結果報告,并顯示在觸摸屏上。

  2. 查看報告:報告包括細胞總數、活細胞數、死細胞數、活細胞比例等。你還可以查看細胞的大小分布、形態等詳細信息。

  3. 調整報告設置:根據需要,您可以選擇導出數據或調整報告設置。

2.6 導出數據

  1. 點擊“Export"按鈕,將實驗數據導出為 CSV 格式文件。

  2. 通過USB或網絡將文件轉移到電腦上,以進行進一步分析。

3. 高級功能與設置

3.1 多通道熒光染料分析

如果您正在使用多個熒光染料(如Calcein-AM、PI、Hoechst等),可以選擇適當的熒光通道進行細胞分析:

  1. 在設置中選擇“Fluorescent Mode"并每個通道的染料類型。

  2. 儀器會自動切換不同的熒光通道,識別不同的細胞群體(例如,活細胞、死細胞、細胞核等)。

3.2 細胞大小和形態分析

通過細胞大小和形態分析功能,您可以評估細胞的健康狀況和群體分布:

  1. 選擇“Size Distribution"模式,儀器會根據細胞大小對樣本進行分類,并生成直方圖。

  2. 進一步分析細胞的形態特征,觀察細胞是否有異常形態(如細胞碎片等)。

4. 維護與保養

4.1 清潔

定期清潔Countess 3 FL儀器,特別是顯微鏡鏡頭和樣品腔:

  1. 用無塵布清潔顯微鏡鏡頭,避免灰塵和污漬影響圖像質量。

  2. 清潔樣品腔,確保沒有殘留的樣品或染料,避免交叉污染。

4.2 校準

Countess 3 FL具有自動校準功能,但建議定期進行校準檢查,確保儀器的計數結果準確:

  1. 使用標準細胞懸液進行校準,檢查儀器計數的準確性。

  2. 根據儀器使用頻率,建議每隔一段時間重新校準。

4.3 軟件更新

定期檢查并更新儀器的操作系統和分析軟件:

  1. 根據賽默飛公司發布的軟件更新通知,下載并安裝最新的軟件版本,確保儀器的功能和性能得到優化。

5. 常見問題解答

5.1 儀器無法啟動

  • 確保電源插頭連接正確,電源開關已打開。

  • 檢查電源指示燈是否亮起,確保電源正常。

5.2 樣本圖像模糊

  • 檢查顯微鏡鏡頭是否干凈,如有灰塵,使用無塵布輕輕擦拭。

  • 檢查樣品腔,確保沒有氣泡,并確保樣本液面平整。

5.3 計數結果與預期差異

  • 檢查染料的使用是否正確,確保染料與細胞的匹配。

  • 確保選擇了正確的計數模式,并且設置了合適的參數(如熒光增益、曝光時間等)。

  • 確保樣品均勻,并且細胞濃度在適合儀器測量的范圍內。

總結

賽默飛Countess 3 FL自動細胞計數儀通過自動化操作、熒光顯微技術、智能圖像分析,提供高效、精確的細胞計數和分析功能。通過本文提供的步驟,您可以快速上手并有效利用Countess 3 FL進行細胞研究。定期維護、更新和適當的設置調整,能夠確保儀器長期穩定地為您提供精準的實驗結果。

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