賽默飛 Countess 3 FL 自動細胞計數儀 是一款高精度、自動化的細胞計數和分析工具,結合了熒光顯微鏡技術和先進的圖像分析功能。以下是使用 Countess 3 FL 自動細胞計數儀的詳細教程,幫助用戶快速上手并有效利用儀器進行細胞分析。
1. 開始前準備
在使用Countess 3 FL之前,確保儀器和樣本準備好。
1.1 儀器準備
接通電源:確保儀器連接電源,并開啟電源按鈕。
檢查儀器狀態:在儀器啟動后,等待系統自檢完成。此時屏幕上會顯示儀器的歡迎界面,確認沒有錯誤提示。
清潔樣本腔和顯微鏡鏡頭:使用適當的清潔工具(如無塵布和清潔液)清潔儀器的顯微鏡鏡頭和樣本腔,避免灰塵影響結果。
1.2 樣本準備
準備細胞懸液:確保細胞懸液均勻,必要時使用離心機沉淀細胞,去除上清液。
選擇適當的染料:根據需要使用臺盼藍或熒光染料(如Calcein-AM、PI等),將染料加入細胞懸液中,幫助區分活細胞與死細胞。
2. 操作步驟
2.1 啟動儀器
打開 Countess 3 FL,并觸摸屏幕上的 "Start" 按鈕進入主菜單。
在主菜單中,選擇適合你實驗的計數模式(如臺盼藍染色、熒光染料分析等)。
2.2 樣本加載
將準備好的細胞懸液輕輕滴入計數板或樣品腔。確保液體的表面平整,避免氣泡干擾。
使用Countess 3 FL的專用樣品腔蓋住樣品,確保沒有氣泡。插入樣品腔到儀器的掃描區域。
2.3 設置計數參數
選擇適合的實驗模式:
調整其他實驗設置(如增益、曝光時間等),以確保熒光信號清晰可見,細胞圖像清晰。
2.4 運行計數
按下 “Start Counting" 按鈕,儀器將自動開始圖像采集與分析。Countess 3 FL會掃描樣品中的細胞圖像,并進行自動識別和計數。
在分析過程中,Countess 3 FL會自動顯示細胞數量、活細胞和死細胞的比例、細胞大小分布等數據。
2.5 查看分析結果
分析完成后,儀器會自動生成詳細的結果報告,并顯示在觸摸屏上。
查看報告:報告包括細胞總數、活細胞數、死細胞數、活細胞比例等。你還可以查看細胞的大小分布、形態等詳細信息。
調整報告設置:根據需要,您可以選擇導出數據或調整報告設置。
2.6 導出數據
點擊“Export"按鈕,將實驗數據導出為 CSV 格式文件。
通過USB或網絡將文件轉移到電腦上,以進行進一步分析。
3. 高級功能與設置
3.1 多通道熒光染料分析
如果您正在使用多個熒光染料(如Calcein-AM、PI、Hoechst等),可以選擇適當的熒光通道進行細胞分析:
在設置中選擇“Fluorescent Mode"并每個通道的染料類型。
儀器會自動切換不同的熒光通道,識別不同的細胞群體(例如,活細胞、死細胞、細胞核等)。
3.2 細胞大小和形態分析
通過細胞大小和形態分析功能,您可以評估細胞的健康狀況和群體分布:
選擇“Size Distribution"模式,儀器會根據細胞大小對樣本進行分類,并生成直方圖。
進一步分析細胞的形態特征,觀察細胞是否有異常形態(如細胞碎片等)。
4. 維護與保養
4.1 清潔
定期清潔Countess 3 FL儀器,特別是顯微鏡鏡頭和樣品腔:
用無塵布清潔顯微鏡鏡頭,避免灰塵和污漬影響圖像質量。
清潔樣品腔,確保沒有殘留的樣品或染料,避免交叉污染。
4.2 校準
Countess 3 FL具有自動校準功能,但建議定期進行校準檢查,確保儀器的計數結果準確:
使用標準細胞懸液進行校準,檢查儀器計數的準確性。
根據儀器使用頻率,建議每隔一段時間重新校準。
4.3 軟件更新
定期檢查并更新儀器的操作系統和分析軟件:
根據賽默飛公司發布的軟件更新通知,下載并安裝最新的軟件版本,確保儀器的功能和性能得到優化。
5. 常見問題解答
5.1 儀器無法啟動
確保電源插頭連接正確,電源開關已打開。
檢查電源指示燈是否亮起,確保電源正常。
5.2 樣本圖像模糊
5.3 計數結果與預期差異
總結
賽默飛Countess 3 FL自動細胞計數儀通過自動化操作、熒光顯微技術、智能圖像分析,提供高效、精確的細胞計數和分析功能。通過本文提供的步驟,您可以快速上手并有效利用Countess 3 FL進行細胞研究。定期維護、更新和適當的設置調整,能夠確保儀器長期穩定地為您提供精準的實驗結果。